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标题: MSC容易老化且代间隔很短 [打印本页]

作者: 凤仪飘雪 时间: 2010-3-30 22:54 标题: MSC容易老化且代间隔很短

如题，MSC不是长梭形，贴壁的地方会形成齿状的边缘。而且代间隔仅为一天，即第一天1:2传代，第二天又可以传代了！是怎么回事啊？

作者: ziyunfei1982 时间: 2010-3-31 15:38

上图吧，没图没真相

作者: angel-sakura 时间: 2010-3-31 22:24

你是做原代培养吗？会不会是分离了其他细胞啊？

作者: 凤仪飘雪 时间: 2010-4-1 11:16

回复 4# angel-sakura 2 U3 c) X; k6 R5 }0 N9 m- {

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是原代培养，做过流式了，细胞纯度有80%左右。

作者: 凤仪飘雪 时间: 2010-4-1 11:31

图有点畸形啊~

作者: 细胞海洋 时间: 2010-4-1 12:01

图有点畸形啊~8 s# s( N0 u! \0 E3 @9 A
凤仪飘雪发表于 2010-4-1 11:31

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点击会打开就正常了

作者: angel-sakura 时间: 2010-4-1 20:55

是不是接种密度低了？有时候接种密度低了细胞确实会呈现这种形状。

作者: 凤仪飘雪 时间: 2010-4-1 21:31

是原代培养啊，我用的是全骨髓法，5ml骨髓接种一个25cm的小方瓶，因为有血细胞在，所以无法进行计数。

作者: foxp3 时间: 2010-4-3 12:21

明显和细胞密度有关啊！

作者: 凤仪飘雪 时间: 2010-4-4 12:16

明显和细胞密度有关啊！
: F$ q, k7 ^) C i- J$ @6 L. Cfoxp3 发表于 2010-4-3 12:21

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是5ml的全骨髓，经过洗涤后补充培养基到10ml，那这位大虾平常都用多少骨髓接种25cm小方瓶呢？

作者: cuicuienya 时间: 2010-4-5 22:07

第一张图密度太大了( U6 f& ?5 K3 N2 q* X
细胞只有头几代的形态是均一的梭形，细胞成熟后就变大了，形态也开始不规则

作者: 色色兔 时间: 2010-4-9 16:29

我也是这样，细胞出现了老化。不知道为什么

作者: icesnow 时间: 2010-4-12 09:48

细胞密度的关系，不过这个是原代吗，细胞里面细胞器有点粗，可能是血清的关系

作者: bluecloud 时间: 2010-4-13 09:45

我觉得不要频繁传代，胰酶会对干细胞造成损害的，使其容易老化凋亡，所以应该在前几代就把它用掉，此时的干细胞活力较好。另外在传代时密度不宜过小，会造成细胞铺展的很开进一步老化凋亡。

作者: kqyy 时间: 2010-4-16 11:13

我的细胞也容易分化,我是1:2传的,原代12天长满,P1代 8天长满,P2 形态就不好了,并且长得也慢,我QQ252067350,我们一起探索吧,验证请注明"干细胞战友",一定要加我啊!

作者: 凤仪飘雪 时间: 2010-4-16 11:43

我的细胞P1代传代的第二天就全部长满了，再放一天就老掉了~

作者: tjutiger 时间: 2010-4-17 15:34

我认为是培养基的问题，比如DMEM+10%FBS就很容易老化和分化，建议楼主更换培养基试试。

作者: 凤仪飘雪 时间: 2010-4-18 15:24

我认为是培养基的问题，比如DMEM+10%FBS就很容易老化和分化，建议楼主更换培养基试试。
2 I3 S* w& m! p t, Ftjutiger 发表于 2010-4-17 15:34

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那应该换成什么呢？

作者: missyoudad 时间: 2010-4-26 12:50

感觉您的细胞老化了

作者: 烂桃 时间: 2010-4-26 15:20

两三毫升全骨髓，加培养基到五六毫升接种到十厘米的培养皿中

作者: 157238360jwj 时间: 2010-4-27 20:39

原代细胞怎么感觉代谢物好多，而且细胞比较老了，请问你们用的是什么培养基啊，我们实验室用的培养体系：DMEM\F12+10%FBS+BFGF(50ml体系加50ul)。感觉养的细胞很漂亮啊。。

作者: bing119 时间: 2010-4-29 20:10

我认为是培养基的问题，比如DMEM+10%FBS就很容易老化和分化，建议楼主更换培养基试试

换成什么那？期待中

作者: dylm2000 时间: 2010-5-1 05:14

接种密度很重要

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