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标题: MSCS的分离纯化问题 [打印本页]

作者: bypw 时间: 2010-4-13 22:02 标题: MSCS的分离纯化问题

我想请教大家一下啊，我想取SD大鼠的骨髓间充质干细胞来做诱导分化，但是取的时候纯度只有60%左右啊，怎么样可以提供它的纯度啊

作者: bypw 时间: 2010-4-13 22:02

做的是流式鉴定的

作者: hawkyiger 时间: 2010-4-14 08:59

什么意思？通过什么来判断它的纯度的？体外扩增了多久？不过实际上至今还没有方法可以在体外纯化或克隆化间充质干细胞，当前惟一的方法是体外富集MSC, 即收集培养贴壁的细胞。经过多次传代和长期扩增的方法

作者: gu_enyan0715 时间: 2010-4-14 10:22

理论上可以通过流式分选的方法，不过这个需要对仪器的要求很高，很少有实验室能达到这样的条件。如果时间允许，可以用有限稀释法（接种96孔板，每空一个细胞），将细胞进行单个培养，得到的单细胞克隆能达到高纯度，不过这样的实验要求时间就很长，细胞生长需要较长的时间，工作量也很大。
如果不要求绝对的纯度还是建议用楼上的方法进行纯化。

作者: missyoudad 时间: 2010-4-20 23:55

MACS

作者: tanhehe1006 时间: 2010-4-21 00:35

个人觉得纯度低可以从分离培养上改进方法，不知道楼主怎样分离的MSC。建议用Ficoll密度梯度一下试试收集后的细胞，扩增后再上流式看看

作者: 烂桃 时间: 2010-4-21 08:50

回复 1# bypw

楼主第几代做的流式鉴定啊，传代可以纯化，我用第三代做流式纯度达到99%

作者: Robert-A 时间: 2010-4-30 12:55

看你用的是什么办法分离的，所选用分离液的密度是多大，这直接决定了你所得到细胞的纯度和增殖能力，而且要得到纯度高的细胞需要进行传代，一般在3代的时候细胞均一性比较好

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