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标题: 2010，3月最新MSCS诱导分化方法 [打印本页]

作者: bypw 时间: 2010-4-14 23:55 标题: 2010，3月最新MSCS诱导分化方法

本帖最后由细胞海洋于 2010-4-15 06:54 编辑
' z* c5 |7 i% ^
最近写文章，标书，做实验，忙的不可开交，但是这些所有的事情都需要相关文献的支持才能解决，但是看文献是很痛苦的事情，一时之间很难了解全面，所以就想能不能有一个平台专门给人讲解文献，就向现在我们很多实验室正在开展的文献介绍会一样，专门介绍一些最新的文献和相关领域的进展文献。
所以就想干细胞之家能不能在这个方面有一些突破，鼓励会员以更加清楚方式的讲解文献。如果每人安以下方式提供一篇文献，就会大大提供我们的文献量和知识量，当然只是鼓励，不要求必须这样。# ?$ l9 D- M& g! s0 I$ m- J5 z

我正在跟版主商量看看这样是否可行，希望大家有什么意见尽量回复，这样的话说不定我们可以创造出这样一个平台，希望大家觉得可以的多多支持啊，多多留言，多多出主意。助人者自助。) b- K. s: d2 }3 r
  x- y3 o/ q$ M2 G; a) T
   模板为：8 T: P" E3 a2 s6 `" J

                              标题7 ]7 R' i) _" |4 v$ ?8 {" |
                     1 相关研究的背景* ~3 G( }% ]- }2 N% d6 y
                     2  这篇文章的研究目的8 y' F; u# Q* E3 Y6 _1 H
                     3 技术路线) w% w1 E9 A! u1 r
                     4 结论（包括新颖的结论和文章结论）( m( v3 y/ G# b: U4 [+ p! c- G
                     5  读文章的收获或者其他的补充
                     6 提供原文  , Y) p" h( h( T) H& p1 q; f% }5 N

下面是我找的2010，3月21日发表的一片文章，作为列子，
      Expression of Pdx1 mediates differentiation from mesenchymal stem cells into insulin-producing cells.
# p/ `  N4 I& c" i7 o
                                          Mol Biol Rep. 2010 Mar 21. 3 G" a- T" V2 o: O* c* }

1    相关背景:目前对于MSCS的体外诱导分化为胰岛素分泌细胞不论国际还是国内主要利用两种方法，一种是在体外利用小分子化合物或者损伤胰腺的蛋白匀浆来诱导MSCS分化成胰岛素分泌细胞，另一种是利用分子生物学的方法构建pdx-1真核表达质粒来转染MSCS后使其向胰岛素分泌细胞分化。& A+ r: n; Y/ |4 o& g: p
  2    这篇文章的目的：这篇文章主要有两个目的，一个是想证实一下pdx-1的真核表达质粒是否能诱导大鼠的MSCS分化成胰岛素分泌细胞，第二是为了pdx-1真核表达质粒激活其它胰岛素基因表达的分子机制。; E- `1 ?$ X# W
  3    这篇文章的技术路线：' ?; n* D4 N, R( x
               (1)MSCS的培养和鉴定 / f! Q- e1 l% m5 s
               (2)重组真核表达质粒pEGFP-Pdx1 and pcDNA-Pdx1的构建 , L" T- a6 h. r  J
               (3)利用构建的真核表达质粒转染MSCS                o/ W; V( h! f' r  o- @* |0 O% ~: d
                     (4)利用RT-PCR检测转染后的MSCS细胞中是否表达pdx-1基因
            (5)利用westernblot 检测转染后的MSCS细胞中是否表达pdx-1蛋白
            (6)体外利用培养基诱导其分化（3天低糖，9天高糖）8 f& ]& i: Y& G' M4 ~& v0 n
            (7)诱导12天后利用DTZ染色鉴定MSCS是否分化成了胰岛素分泌细胞  （形态学鉴定）, u% a  ]2 T# c3 w
            (8)利用化学免疫荧光方法检测胰岛素的分泌（功能学鉴定）' H- ]2 i6 ?# H0 C
            (9)利用RT-PCR和半定量real-time pcr 鉴定是否有正常胰岛细胞相关基因的表达及其量（分子生物学鉴定）& H. Y/ w  b' b6 @7 W# \( D
            （10）利用westernblot 检测是否有正常胰岛细胞相关蛋白的表达
  4    这篇文章的新颖之处：作者讨论提出，在低糖的条件下，pdx-1定位于MSCS的原子核周围，于共轭抑制物相互作用，阻止MSCS向胰岛素分泌细胞分化。而在高糖培养基条件下pdx-1富集到MSCS的核原浆，与共轭激活物相互作用，激活其下游基因如：Ngn3等，并与其启动子结合，促进其表达，从而使MSCS向胰岛细胞分化。* V0 g; t8 ?* C- Y  [) z

  5    收获：通过这篇文章我们在体外研究干细胞向胰岛细胞分化治疗糖尿病时，应该注意不同的葡萄糖浓度下，对其诱导的速度和效率上都将存在影响。
/ b0 q& n% C' B; ]; a
  6    提供原文

作者: wuxiao101325 时间: 2010-4-15 08:09

顶！好贴！谢谢分享！

作者: biowx 时间: 2010-4-15 09:48

顶，非常不错的建议& O' b' H! W% U: q% @% v1 E
这种交流，可以节约很多时间

作者: cdcliwei 时间: 2010-4-15 11:32

Well done!

作者: dalyschloe 时间: 2010-4-15 13:54

强悍哥，就是你了

作者: angel-sakura 时间: 2010-4-15 22:53

国内外很多牛的实验室都是这样做的~~~非常支持这种做法！！！！

作者: tjutiger 时间: 2010-4-17 09:59

最近要做论文汇报，真是受教了！好方法！感谢楼主！！！

作者: bjchen789 时间: 2010-4-19 09:32

顶，非常不错的建议/ H' ~" _: A; S' ~, R! @9 h
* |* Q- G+ N3 r& p这种交流，可以节约很多时间

作者: luohucy 时间: 2010-4-19 12:51

支持楼主我只是一个学生没有什么好的意见不过我会多多学习的

作者: 限量版小怪兽 时间: 2010-4-20 09:58

谢谢楼主分享呀真是很好的学习方法对大家是个很好的创意

作者: 5784630 时间: 2010-4-20 13:15

good job！

作者: 一转身的距离 时间: 2010-4-20 22:19

这个方法确实挺好的

作者: 奇怪 时间: 2010-4-22 07:20

good job！

作者: get0715 时间: 2010-4-22 09:22

太好的建议了，每个人在学习的同时也帮助了更多的人，同时自己也会从中受益许多。

作者: missyoudad 时间: 2010-4-26 12:40

不错

作者: 长乐未央 时间: 2010-4-26 17:51

我是来打酱油的

作者: 心如长空 时间: 2010-4-26 17:56

有才哥，支持一下。

作者: sunyucheng 时间: 2010-4-26 18:47

支持下！！！

作者: viva 时间: 2010-5-1 16:45

支持

作者: helen841102 时间: 2010-5-6 22:37

真好谢谢

作者: wujinglei 时间: 2010-5-7 15:15

谢谢了啊，不错

作者: zhangjinxy 时间: 2010-5-8 23:19

学习的好方法啊

作者: sidalin301 时间: 2010-5-9 20:35

实验室打工仔感谢你

作者: missyoudad 时间: 2010-5-10 23:57

希望真的能办起来。期待中

作者: bypw 时间: 2010-5-11 18:30

回复 24# missyoudad

9 ^, X4 B9 i: _, Y/ C3 g9 Z
呵呵，大家帮忙啊

作者: qianqianlaile 时间: 2010-5-12 11:06

开卷有益，谢了

作者: xzmcyy@163.com 时间: 2010-5-16 16:16

顶，非常不错的建议. 1 k9 ?) G0 c" H: @; `
这种交流，可以节约很多时间, F9 W! y( W/ Z& m% ]! o
一起做吧

作者: bypw 时间: 2010-5-17 00:25

回复 27# xzmcyy@163.com
# o9 I* W- b$ o8 k: p: y0 n
好啊，有空联系一下啊，我的QQ在啊

作者: weianh 时间: 2010-5-20 10:15

这真是个好办法，现在写文章，脑袋都大的很，要是有这样的讲解文献，事半功倍啊

作者: jqm12345 时间: 2010-6-11 16:28

很不错的文章，相当有用

作者: why121 时间: 2010-8-19 11:54

感谢楼主提出那么好的建议希望大家都用实际行动来支持中国的科学发展

作者: chuanbaozang 时间: 2010-8-23 13:56

好创意，相信大家都会积极参与，也会从中获益的

作者: dragon513 时间: 2010-8-25 08:52

提法不错，得大家响应才行呀

作者: lanyew 时间: 2010-8-26 13:32

支持楼主！

作者: hxf_86 时间: 2010-9-1 23:10

我觉得这个方法无论对谁都是很有好处的，但是还必须考虑到一个问题，就是每个人对同一个文章的看法是不一样的，所注意到的文章的亮点也是不一样的，如果是通过这样的方法的话，难免会产生偏差哦～9 Q. F1 d7 |+ w$ J
而且我觉得，提纲可以简约一点，把作者的亮点列出来就可以了

作者: 白衣小彩 时间: 2010-9-3 15:57

这倒是个不错的方法哦

作者: qiongyacc 时间: 2010-9-21 22:28

挺好的

作者: karnin 时间: 2010-9-24 11:56

我们老板也是这样规定的，每个月每个人至少写这样的读书报告上交，现在又增加每个月两个研究生汇报，这样交流起来确实快很多，即使是几个不同的研究领域，也可以互相借鉴。
+ |+ \1 s- l m. I6 s
顶！顶！顶

作者: henryjia 时间: 2010-10-8 21:19

强烈支持！！！

作者: cijiaer 时间: 2010-10-18 12:46

谢谢楼主分享，真是很好的学习方法

作者: gxbzj吉祥草 时间: 2010-10-22 13:18

好方法。。。

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