干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 想请问胰酶消化细胞大概都是多长时间?这个度怎么把握? [打印本页]

作者: caoyue    时间: 2018-7-31 10:41     标题: 想请问胰酶消化细胞大概都是多长时间?这个度怎么把握?

想请问胰酶消化细胞大概都是多长时间?这个度怎么把握?
作者: 奇幻雪蓝    时间: 2018-7-31 11:28


作者: 米兰小镇    时间: 2018-7-31 13:41

MSC我们是37℃消化(3-5min),显微镜下观察贴壁细胞形态变化,当贴壁msc胞质回缩,细胞间隙不断增大,细胞呈近球形同时有少量圆形细胞脱壁时,终止消化
) F9 B- t) }$ N( d/ n& W0 I; l
作者: alex19901    时间: 2018-8-1 10:49

现在这个天气的温度,你可以再显微镜下观察消化情况,纤维状细胞从壁上脱落,变圆即可,而且当绝大部分细胞脱落时,需要终止消化。
作者: ltickp    时间: 2018-8-1 16:45

具体消化时间根据胰酶类型和胰酶浓度而定,一般镜下观察大部分视野细胞近圆形,少量细胞漂浮;细胞较均匀的消化为单个细胞说明消化效果较好
作者: 15225119792    时间: 2018-8-1 18:42

回复 caoyue 的帖子$ M: F9 j# A( P: ?! X' Y) w# J
4 d" u: H4 `# E% S" \/ V: r* B4 l1 _
从加胰酶到加终止液,不超过3分钟,时间长了对细胞有影响
作者: caoyue    时间: 2018-8-7 11:15

回复 15225119792 的帖子& W3 t" Y' _6 P) b4 @# q" x; S- z

8 v0 l; M5 P$ d$ ]! A$ l! `第一天观察漂浮的细胞很多,是不是胰酶消化时间过长,还是没有震荡好。
作者: caoyue    时间: 2018-8-7 11:29

回复 alex19901 的帖子9 ^/ u# I+ ?% |" f

1 w7 T* r3 r0 `+ y3 ^第一天观察时,贴壁细胞很少,漂浮的死细胞较多,是不是消化时间过长?还是没有摇晃均匀?
作者: a1249471827    时间: 2018-8-16 13:50

应该是消化时间长了,或者是胰酶浓度比较高,我们实验室用的胰酶是稀释1倍,即0.125%浓度的
作者: a1249471827    时间: 2018-8-16 16:54

回复 米兰小镇 的帖子
( @, r# p% Q, Z& D
9 t) p6 C+ B. m+ Y你好,你说的消化法我用过,这个时候在显微镜下仍有大量细胞在培养瓶上,吹打之后依然观察依然后细胞在培养瓶上,培养瓶上的细胞就不能要了,算做正常的损失,是吗?
作者: 18911772023    时间: 2019-5-6 14:20

一般1分钟左右




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5