干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 养细胞新污染~~~求鉴定 [打印本页]

作者: angel-sakura 时间: 2010-4-21 23:39 标题: 养细胞新污染~~~求鉴定

我同级的一个人养的SMC（平滑肌细胞），发现有几瓶都出现如下图的污染，污染物为颗粒状，能自由游动（！），其中大部分是固定在瓶底的，瓶中细胞都死亡，且能明显的看到这些污染物沿细胞边缘排列。此外，培养基颜色并未发生明显的改变，培养基用的是1640~~~~3 ?! P! D! G; j9 X" w5 O' E1 W

- Q/ \2 L/ J. D
最后一张是正常的SMC~~& Q8 \! Y! G$ F% \, G z( P
谢谢·~

图片附件: smc1d-1.jpg (2010-4-21 23:38, 212.51 KB) / 下载次数 311
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=NjQwMHw0MzA0Y2ZkYXwxNzkzMTE1Mzc1fDA%3D

图片附件: smc1d-2.jpg (2010-4-21 23:38, 198.92 KB) / 下载次数 320
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=NjQwMXwyY2E5OGY3NHwxNzkzMTE1Mzc1fDA%3D

图片附件: smc1d.jpg (2010-4-21 23:38, 191.24 KB) / 下载次数 324
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=NjQwMnxhMTZlNzQwN3wxNzkzMTE1Mzc1fDA%3D

图片附件: smc8(3).jpg (2010-4-21 23:39, 220.25 KB) / 下载次数 290
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=NjQwM3xiYjVhYjRmZHwxNzkzMTE1Mzc1fDA%3D

图片附件: smc5.jpg (2010-4-21 23:39, 117.09 KB) / 下载次数 347
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=NjQwNHw2OWYwZjU5N3wxNzkzMTE1Mzc1fDA%3D

作者: guochutao 时间: 2010-4-22 08:52

培养基的颜色有什么变化了？有点像真菌的污染哦，最好一张正常的MSC的状态不是很好哦，不知你的原代细胞了还是细胞系。

作者: dyswgy 时间: 2010-4-22 09:04

太明显了，细菌感染，是细菌在游动，有点像球菌感染。细胞快扔掉！！！！

作者: hljzyydx 时间: 2010-4-22 10:31

1.个人感觉不像是真菌污染，如果是真菌的话肉眼就能看见很大的真菌球
2.我觉得细菌污染的可能性比较大，但是如果是细菌污染的话那也太多了吧
3.建议看看培养液的浑浊程度，一般污染的话培养液会很浑浊的

作者: guochutao 时间: 2010-4-22 10:58

回复 4# hljzyydx
你说的肉眼可见应该是是霉菌吧

作者: czzhaozhu 时间: 2010-4-22 11:03

请问搂主是培养几天出现以上情况的？培养基颜色没有变化，细菌污染可以排除；霉菌污染可能性也不大，我个人观点有点像支原体污染，请问你培养体系中动物源性的成分多吗？

作者: angel-sakura 时间: 2010-4-22 22:51

回复 2# guochutao 1 g# ]# j; _; O: h% w9 s. z
额。。。。不是MSC，是SMC，培养基颜色没什么变化，但真菌的话应该不会做曲线运动吧？

作者: angel-sakura 时间: 2010-4-22 22:52

回复 4# hljzyydx ) G1 c& b9 \/ Q% B' ~
5 `& h. L- C' Y
培养基不浑浊，也没变黄！而且那些污染物是贴壁的！有的还游动！

作者: angel-sakura 时间: 2010-4-22 22:54

回复 6# czzhaozhu
支原体污染的话应该是看不到的吧？但目前10倍镜下就能看到~

作者: zzp40 时间: 2010-4-23 20:22

我们实验室的细胞也有和你一样的污染，一直找不到原因，期待高手指点一二。。。

作者: chenlijuanclj 时间: 2010-4-24 10:26

黑胶虫啦

作者: chenlijuanclj 时间: 2010-4-24 10:27

400倍下布朗运动

作者: dulaiyouyu 时间: 2010-4-24 12:29

不知道你说的这些会游动的东西，是不是有点儿长条形，不是圆形的？密密麻麻。
我也遇到过这种情况，有点儿像是小胶虫，在细胞状态不好的时候就会出现。- r5 |% W6 L7 ~( R7 O) m( X
有人认为是外源的菌，有人认为是细胞本身分泌的。

作者: 圣牛 时间: 2010-4-26 22:50

感觉像球菌感染...

作者: zzp40 时间: 2010-4-27 20:28

如果是黑胶虫的话有什么解决办法吗？

作者: Robert-A 时间: 2010-4-28 09:41

你测试下培养前和培养后的培养液体PH值，你加血清没？

作者: xbs530515 时间: 2010-5-26 23:19

是细菌污染，很常见的。
支原体污染，肉眼不能看出！

作者: ouyi2738 时间: 2010-6-7 00:21

我的细胞在培养中也遇到过这种情况：“污染物为颗粒状，能自由游动（！），其中大部分是固定在瓶底的，瓶中细胞都死亡，且能明显的看到这些污染物沿细胞边缘排列。此外，培养基颜色并未发生明显的改变” 。肯定不是常见细菌污染，他们在400x下清晰可见，要比常见的球菌小非常多，而且在其生长密度很大的情况下，培养液也不会变色变混。应该也不是支原体污染，我们做过支原体检测，呈阴性，而且添加泰乐菌素培养对其也没有抑制作用。胶虫污染，我们尝试更换了各种血清（paa，gibco，hyclone），无效。+ z9 {$ t4 r8 z) m- T$ O
由于污染细胞来自于其他实验室馈赠，无法丢弃，目前仍然没有找到将其彻底清除的办法。分享一点我们的心得：1、此污染与细胞生长明显呈竞争关系，细胞密度大生长快，就不会受影响，细胞密度低，培养一段时间后就会出现楼主所述情况，建议传代时将细胞尽量分散均匀，提高接种密度。2、有此污染的细胞，传代后明显可见培养液中有比细胞小很多的杂质，很脏，每次传代后其增殖势头加快，建议传代时采用低俗离心的方法将细胞与其分离，500转以下离心可有效的将细胞与其分离。3、此种污染可以通过培养箱中空气传播，建议将由污染的细胞使用单独培养箱培养，使用培养皿培养被污染的几率较高。

作者: lixiaodong 时间: 2010-6-7 17:58

网上有很多关于所谓的黑焦虫的说法。还没有定论。我们也碰到类似的情况，双抗和抗真菌多加了仍出现，尤其是在传代时低细胞密度的时候易发生。怀疑和血清的质量最相关。

作者: sxjcsq2010 时间: 2010-6-7 20:10

估计是链球菌污染吧。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)