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标题:
实验室的日常清理，做一名合格的扫地僧
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作者:
LemnisCare
时间:
2019-2-14 17:43
标题:
实验室的日常清理，做一名合格的扫地僧
PCR实验里最怕出现什么问题？当然是辛苦做出来的结果假阳性了。
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当PCR出现假阳性的时候，我们常常会考虑是不是引物/Mix/*等等污染模板，然后一一排查，劳心劳累费时费力，有时还是找不到原因，简直要崩溃。
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这里我觉得要延伸思考一下，这些试剂仪器到底为什么会被污染了呢？其实是核酸气溶胶污染。
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离心机离心/剧烈地摇动反应管/PCR开盖/吸样时及移液器的反复吸样等等，会产生空气与液体表面摩擦的，都会产生核酸气溶胶，也就是实验室里（或移液枪内）弥漫着含有长短不一核酸片段的小水珠或小颗粒，这些小颗粒沉降（打到）到空白样中导致最后扩增出了条带。
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可想而知，这些核酸小液滴还会落到实验台面/PCR仪/移液枪/*头*盒子等等地方，如果我们不注意，这些核酸小液滴就会日积月累地积聚，这样做实验就特别出现问题比如PCR假阳性。
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那么我们平常做实验或者实验室管理上核酸气溶胶（也就是核酸小液滴）产生了巨大的污染究竟该怎么办呢？
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大面积核酸污染清除操作方法：
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（1）对污染区域使用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行大面积处理，包括：地板、墙面、天花板、门、窗户等地方，同时加大通风量（内循环无用，尽可能外循环）；
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（2）对污染区域内的设备使用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行反复处理；对超净台等含有空气过滤系统的设备，请更换过滤网；对移液器等污染设备采用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行清洗，高温灭菌；
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（3）待污染区域及设备器件清理完成后，使用紫外灯辐照4小时以上；
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（4）可请保洁员按照上述要求（1）（2）（3）连续清理三天；
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（5）设计实验对照组（根据污染源基因片段），进行阴阳对照实验，根据阴性对照确认污染情况，可采用8连排PCR管（2个阳参+6个阴参）；若阳参起跳，阴参起跳，则污染需要继续清理；若阳参起跳，阴参全部不起跳了，则说明污染等到控制，可恢复正常实验；
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核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）一盒500 mL；10平米的房间需要2盒可完成覆盖；其他设备及器件根据情况进行采购；
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大面积核酸气溶胶污染非常难以清除，若不立即采取清理，污染会更加牢固，长期释放污染核酸，导致实验室停工。
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