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标题: mESC免疫荧光实验最近老是出现问题 [打印本页]

作者: mrhighly    时间: 2019-2-27 11:31     标题: mESC免疫荧光实验最近老是出现问题

如题,IF实验以前没事的。最近细胞爬片上长得很好,我用4% PFA固定后也还好,但是有时通透完,有时封闭完,细胞就全部脱壁了。感觉也不是正常的脱壁,而是细胞都成渣渣了。相同条件通透和封闭,别人的细胞就没事,我的爬片一般封闭完就没有细胞了。ES和MEF细胞做的都这样,有人遇到过这样的问题吗?我的爬片用的NEST的,酒精泡会火上烧一下放到孔里,gelatin或是Fibronectin 37度包被2h以上。求助啊各位。




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