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标题: 关于滋养层细胞（3T3） [打印本页]

作者: zjkenan 时间: 2010-4-30 10:38 标题: 关于滋养层细胞（3T3）

我用的3T3细胞做滋养层细胞7 J& N6 @% V! l- \
现在有一点不明白
有人说要用丝裂霉素C处理3T3细胞
然后再接种到有明胶的培养瓶
有人说是接种到有明胶的培养瓶
再用丝裂霉素C处理5 x8 L* Z1 J( ]/ x% F
哪种比较好呢

作者: welldoneding 时间: 2010-4-30 10:48

一般是用丝裂霉素C处理过然后再种到有明胶铺的培养皿比较好，我们实验室是这样做的，那样如果觉得3T3比较稀的话，还可以再加3T3细胞，不过两者都可以，看你习惯吧！

作者: wyannb 时间: 2010-4-30 10:49

当然是先用丝链霉素c先处理然后再接种到饲养层上了，你说的那种先接种到有明胶的培养瓶: Q; u8 N2 u0 w/ E- a$ I W! R1 C% o
再用丝裂霉素C处理只是将处理前的3T3放到明胶处理的培养瓶上而已，为了3t3更好的贴壁罢了。最后还是要接种到明胶处理培养瓶中的。

作者: wyannb 时间: 2010-4-30 10:49

哦，刚才第一句说错了，是处理后接种到培养瓶中

作者: zjkenan 时间: 2010-4-30 10:51

那我还有个问题啊
就是为什么我用丝裂霉素C处理的细胞
放在油明胶的培养瓶里就不贴壁呢- N! x& ~& N4 ~7 _$ @
我用的10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h

作者: wyannb 时间: 2010-4-30 10:58

我用的就是10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h没有问题。能够很好的贴壁

作者: zjkenan 时间: 2010-4-30 11:01

难道是我的明胶有问题么) n0 F/ z ~8 U$ J
我的明胶是0.1%高温消毒的
存在4°5 d5 @) ~: z& B( v+ {
那你明胶怎么用的呢

作者: wyannb 时间: 2010-4-30 11:05

明胶的浓度就是你用的0.1%的，我先是高压灭菌，然后滤一下放到四度保存

作者: hansey 时间: 2010-5-3 21:12

回复 5# zjkenan ; M9 f. s+ @$ y0 _: q: N2 p4 U J J7 t
# q& K& C& o% w1 {0 Y
" w% _7 R& `$ K$ F& J9 W$ {
消化过了？

作者: powerwang521 时间: 2010-5-6 23:24

请问LZ用3T3做滋养层养的是ips吗？

作者: 大刀无敌 时间: 2010-5-8 20:13

先用丝裂霉素处理在铺到明胶包被的瓶子里饲养层要细胞计数按比例铺

作者: 天龙八部 时间: 2015-1-17 14:24

弱弱的问一下，丝裂霉素是用什么溶解配制的？

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