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标题: 在细胞培养冻存时，冻存液中为什么要加入DMSO,它的作用原理是什么？ [打印本页]

作者: tk1504008 时间: 2010-5-7 09:56 标题: 在细胞培养冻存时，冻存液中为什么要加入DMSO,它的作用原理是什么？

在细胞培养冻存时，冻存液中为什么要加入DMSO,它的作用原理是什么？

作者: manyuping 时间: 2010-5-7 10:23

它的作用跟甘油类似，但效果比甘油好

作者: maxiaorongqp 时间: 2010-5-7 10:23

防止细胞内形成冰晶，导致细胞死亡

作者: gyuxutong 时间: 2010-5-7 10:23

防止细胞内部形成冰晶结构，破坏细胞

作者: 痞子的烟头 时间: 2010-5-7 10:24

DMSO防止在冻存时形成冰晶，对细胞造成损伤，就如同你在冻存菌种时加甘油是一个道理，, W& L# q0 z& T
另外，建议可以直接百度；

作者: daviehe 时间: 2010-5-7 10:24

DMSO是细胞冻存保护剂啊，在培养液中加入它，可使冰点降低，在缓慢的结条件下，使细胞内水分在冻结前析出细胞外，可使细胞免遭损伤。

作者: neway127 时间: 2010-5-7 10:26

DMSO即二甲基亚砜，在冻存时加入的保护剂，当然也可以加入甘油啊！！主要是因为加入后可以使溶液冰点降低，加之在缓慢冻结条件下，细胞内的水分透出，减少了冰晶的形成，从而避免细胞的损伤。采用慢冻快融的方法能较好地保证细胞存活。

作者: 军医 时间: 2010-5-7 10:34

二甲基亚砜也是有毒的，冻的时候缓慢降温，解冻的时候快速解冻。

作者: wuxiao101325 时间: 2010-5-7 10:40

是一种渗透性保护剂，能够降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。6 {3 M7 A) z6 M g! ?* L: p. w
& [2 Z6 O3 W0 F! {6 w
但是研究表明，DMSO存在严重的毒性作用，与蛋白质疏水集团发生作用，导致蛋白质变性,具有血管毒性和肝肾毒性。

作者: xus1019 时间: 2010-5-7 10:50

DMSO冻细胞5%一般就够了+ Y1 K1 H( \% w* Z4 e3 o
培养细胞的时候浓度要控制在0.5%以下，否则毒性就太大咯

作者: get0715 时间: 2010-5-7 11:05

DMSO属极性溶剂具有很强的吸水性和对肌体的渗透性，冻存时将细胞中的水分置换出来，水在冷冻时容易形成冰晶，从而对细胞有极大的损伤，而DMSO冷冻时不易形成冰晶，从而有效的保护了细胞。

作者: sunsong7 时间: 2010-5-7 11:35

1. 调节渗透压，降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，2.16%的二甲基亚砜渗透压与人体液相当，10%二甲基亚砜相当于=100ml*1.1/78.1=1400mmol/L
2. 改变细胞膜的通透性，抑制细胞的生长、降低细胞活力、增大细胞膜代谢对产物的通透性。3 ], G' {6 D3 V, T- L- G
3. 不良反应：DMSO存在严重的毒性作用，与蛋白质疏水集团发生作用，导致蛋白质变性,具有血管毒性和肝肾毒性.最为常见的为恶心、呕吐、皮疹及在皮肤、和呼出的气体中发出大蒜、洋葱、牡蛎味。

作者: ambassador 时间: 2010-5-7 13:28

回复 12# sunsong7 6 g/ E9 b; W" _5 ?/ J S
3 h0 w& P. H1 N4 A0 F' a+ j

谢谢总结！

作者: chuanbaozang 时间: 2010-5-7 13:51

我们使用的DMSO浓度都是10%$ D8 u* o- A0 n8 }% |( M8 I6 H4 {
冻存前现配并且预冷，因为在较高温度下甚至室温都会有较大毒性。为了更好的保存细胞，我们适当提高下血清浓度

作者: 双刀 时间: 2010-5-7 14:06

为了防止细胞在冷冻的时候被冻死。一般冻细胞加10%的DMSO。冻细菌的时候可用甘油。

作者: uyunbilig 时间: 2010-5-7 21:16

我们一般用10%的DMSO，解冻后加有血清的培养液1500转离心5分钟洗干净上清重新加上新的培养液就可以了。我用过的几种细胞存活率都很高！

作者: xbs530515 时间: 2010-5-26 23:22

冻存保护剂，一般使用时5-10%

作者: decloud2009 时间: 2010-5-27 13:11

冻存细胞时，我们是10%的DMSO，但是会预先加入一部份DMEM来溶解，因为DMSO溶解的时候会产生热，会把细胞杀死的。。

作者: leestone 时间: 2010-5-30 18:08

回复 10# xus1019 4 @( X% E. R5 x% o1 A! I
原來5%就夠了阿～' A, O3 q# u) J( T, T! M9 P' u
9 a+ ^, K* m; D
我們一般Final concerntration 都是用10%DMSO + 血清或培養液

作者: initiation 时间: 2010-6-1 12:40

DMSO中文名为二甲基亚砜，是一种有机溶剂。当冻存细胞时，细胞受到物理损伤，即细胞内形成较大的冰晶，破坏细胞膜系统，DMSO可以防止大冰晶的形成。达到保护细胞的作用。

作者: gaomei210 时间: 2010-6-2 13:52

本帖最后由 gaomei210 于 2010-6-2 13:56 编辑 0 n+ m2 Q4 { Z1 `; [# w5 t

DMSO是保护细胞，不会因为温度骤降而冻死，我一般加10%DMSO和血清混合，实验室也有人用DMSO+FBS+DMEM的，使用DMSO的时候需要注意两点：1.有毒，可通过皮肤渗入。2.DMSO和FBS、DMEM混合时放热，要充分混合10min后再加细胞。

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