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标题: RACE技术 [打印本页]

作者: hdc2001 时间: 2010-5-9 12:09 标题: RACE技术

谁做RACE的啊？大家来说说心得，分享一下成果吧。最好能图文并茂呀。

作者: 细胞海洋 时间: 2010-5-9 19:28

请先开个头抛砖引玉

作者: hdc2001 时间: 2010-5-10 21:58

我准备做RLM-RACE
现在考虑：9 R3 @4 Z2 d" O
1. mRNA是否需要纯化？8 k4 {2 s( \1 g$ K$ ?
2. cDNA合成引物是随机引物，Oligo dT，还是基因特异性引物好？

作者: hdc2001 时间: 2010-7-28 23:25

刚用RACE做完4个基因，效果很好，都成功了。$ p$ D8 @3 e" F3 b9 r) W+ l
1、引物设计很重要；
2、实验前的准备工作要充分；多阅读文献；
3、操作要细心；* C1 S. g; t i* y G0 t
4、要做好持续战斗的心理准备。

作者: baixueyao029 时间: 2010-7-29 09:44

回复 4# hdc2001
你的引物是随机引物，Oligo dT，还是基因特异性引物？

作者: yueyongheng 时间: 2010-8-24 20:25

RACE ：Rapid Amplification of cDNA Ends （快速扩增cDNA末端）(Described by Frohman in 1988)
用于获得全长基因的5’和3’末端（需要知道基因的25个碱基的序列）4 ~' {2 f F6 Y& X2 h% Z3 L
Why do I need the end?
–进行蛋白表达: j( G( S5 [, W% U$ d) o
–分析转录起始位点（5‘端含有调控序列）
–研究基因+ l( C7 ?( P) b. {( T R! D5 t* `
cDNA完整序列的获得对基因结构、蛋白质表达、基因功能的研究至关重要。但是传统的方法难以得到两端的序列（尤其是5‘端）。

作者: yueyongheng 时间: 2010-8-24 20:30

转了一连接主要讲RACE技术的原理和操作6 b! M/ M" A* S
http://www.biomart.cn/experiment/430/457/464/25163.htm

作者: hhchen418 时间: 2010-8-25 08:22

请相信阅读说明书。本人当年是用的invitrogen的，当时也是头一次做RACE，但最终成功了。引物设计非常关键，为了避免走弯路，mRNA要进行纯化

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