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标题: 请教大家冻存PBMC如何才能复苏扩起来? [打印本页]

作者: jiuxuya 时间: 2020-4-18 10:50 标题: 请教大家冻存PBMC如何才能复苏扩起来?

冻存密度多少合适?试过1*10的7的密度,结果培养7天都没涨起来,里面有大量絮状物应该是死了.冻存的时候用的CELLBANK商业冻存剂,哪块要注意呢?

作者: jiuxuya 时间: 2020-4-26 00:33

顶!求助啊谢谢大家!

作者: 剡溪兰客 时间: 2020-5-7 10:42

慢慢摸，我这里已经摸出了配方

作者: jiuxuya 时间: 2020-5-13 17:43

回复剡溪兰客的帖子9 h- E% f+ M- t! d& U
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请教您的冻存密度是多少?一般存储几千万的PBMC

作者: 大胖子阿哥 时间: 2020-5-14 15:01

2-5X10*6/ml

作者: chengeng129 时间: 2020-10-8 09:48

1*10^7 复苏后絮状或者结团可能是从死细胞中释放出来的“粘性”DNA分子将邻近的细胞粘合在一起，产生的可以试试DNase I 看有没有用。或许还有不少细胞。培养七天没有培养起来可能是营养不够多加点血浆或者血替试试看

作者: gondobar 时间: 2020-10-10 15:28

冻存密度0.5~2*10^7都没问题，主要是要注意复苏条件，好好摸索一下，直接告诉大家学不到东西

作者: 碍亏99 时间: 2021-2-19 10:43

我们冻存6*10^7/ml都没问题，两三天就长起来了

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