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标题: 明胶溶液的配制 [打印本页]

作者: 5784630    时间: 2010-5-17 15:34     标题: 明胶溶液的配制

请问铺培养板用的明胶溶液是怎样配置的?我现在有的是明胶粉末,谢谢大家指点!
作者: sky512829    时间: 2010-5-17 16:21

一般干细胞培养铺板的浓度为0.1%,有些人用0.5%。用pbs溶解,水浴溶解彻底,建议用sigma的明胶。溶解后高压灭菌或直接过滤既可使用。
作者: labby    时间: 2010-5-17 16:24

配制0.1%明胶溶液必须用无菌的PBS配制。注意无菌操作。无菌准确称量0.1克(配成100ml溶液)(可以把天平拿到超净台先灭菌),充分摇匀,过夜放置,然后无菌分装,4℃保存。
作者: nhzxcsc    时间: 2010-5-17 18:26

回复 3# labby
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    为什么说必须要用无菌的PBS配置啊?我0.1%的明胶就是使用洗胚胎的水配置的,效果很好的。( v! g- q% `' O& ^1 f
一般操作:
% i" t& u: a6 v  e3 C1、500ml 的洗胚胎的水+ T5 e) h& a5 {8 l
2、加入0.5g的明胶8 g  r6 u- _4 M1 i& ~% ?
3、56℃充分溶解
& M7 ?  D  i( a( |7 q$ P( u& H4、0.22微米滤器过滤备用
作者: nhzxcsc    时间: 2010-5-17 18:27

刚刚忘了说了,水和明胶都是用的sigma的
作者: 开心果王    时间: 2010-5-17 19:18

我们是先配制1%的明胶母液,然后用时再稀释到你所要的浓度,0.1%或其他的。我们是用双蒸水配制的。
作者: cony    时间: 2010-5-17 21:57

前天刚配。0。1%,DPBS,明胶粉。。60-65度溶解。。趁热过滤,分装4度保存。
作者: tomyang1987    时间: 2010-5-17 22:45

学习啦 学习啦
作者: sunshy2772    时间: 2011-6-19 14:33

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* q( A& J" _7 ?* g6 a我用PBS配制的明胶后,经过高压灭菌后,为甚么呈现浑浊样呢?还能用吗?
作者: nibirucome    时间: 2011-6-20 17:49

用双蒸水配的2%明胶为什么不凝固?
作者: 第七舰队    时间: 2011-6-20 18:02

我用去离子水配的,0.1%的,55-65度水浴,趁热过滤,然后高压
作者: sdjjfangfang    时间: 2011-6-20 18:10

我们是用去离子水配的,配的浓度为0.1%。配好后先在室温放置半小时,之后进行高压灭菌。置于4度保存,可以考虑在使用之前进行过滤 ,除掉杂质。
作者: pla269    时间: 2011-6-21 19:55

培养原代细胞加用明胶促进细胞贴壁,可为什么效果不明显,有时更差
作者: fananran2003    时间: 2011-7-4 15:36

我们实验室是二蒸水配的。浓度0.1%,高压后,0.22的滤器过滤后4℃储存。
作者: ningtinglu    时间: 2011-7-12 10:58

用双蒸水配0.1%的明胶,不用溶直接灭菌就好了
作者: 游侠儿2012GX    时间: 2013-4-14 10:04

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过滤之后还要高压?你用什么滤器过滤的?
作者: 250286645    时间: 2013-4-17 10:14

普通单蒸水配制,0.5%的浓度,过程最好加热搅拌均匀,然后用高压灭菌锅灭菌后使用,
作者: mayiwaiwai    时间: 2013-5-16 15:58

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0 e( s8 V  H1 W* F
% I( F/ \( p/ e& P/ x& A; r0.22的可以虑过吗?millipore的明胶液体是不可以通过滤膜的。难道配制的可以?另外也看见有人说用0.2%的明胶,影响不大?
作者: mayiwaiwai    时间: 2013-5-18 10:16

本帖最后由 mayiwaiwai 于 2013-5-18 10:17 编辑 / C4 u9 W8 a1 v/ Y" Y
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可以过滤,0.1%,sigma。三蒸水配制,湿热灭菌。效果很好不过买millipore现成的,0.1%不能过0.22的滤膜,不知道为什么
作者: yueweilei    时间: 2013-6-3 21:55

我们是直接用双蒸水配成0.1%明胶溶液,高压灭菌。
作者: zsc78    时间: 2013-6-6 10:33

如果没有特殊要求,Millipore公司有现成配好的明胶,买来直接用,500ml可以用很久,价格也不贵,省事,好像几百块钱。
作者: zsc78    时间: 2013-6-6 10:33

如果没有特殊要求,Millipore公司有现成配好的明胶,买来直接用,500ml可以用很久,价格也不贵,省事,好像几百块钱。
作者: BDFCM    时间: 2013-6-7 20:51

很简单的啦,直接称取0.5g明胶粉末,加到500ml ddH2O, 摇晃几下,高压灭菌就可以了。我们实验室都是这么干的
作者: huangcong1988    时间: 2013-6-8 09:55

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0 X5 R% [1 d* ]% G, y2 w, x0 J不用过滤么?
作者: BDFCM    时间: 2013-6-8 12:14

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没有过滤
作者: lmh_yixue    时间: 2013-6-13 20:50

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; J, K% ^2 f6 M4 D
4 a# \7 ~3 ?- f2 |0 \我也是这种方法,一样哦!
作者: sdjjfangfang    时间: 2013-7-4 19:20

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& t% S; D0 ^! ~
$ v. E8 d1 Y- ~; Q我们也是用水配的明胶,但是配置的是0.2%的,有点奇怪的是高压灭菌后发现有点浑浊,是因为没有溶解充分吗?
作者: 开心果王    时间: 2013-7-6 02:30

回复 sdjjfangfang 的帖子2 e0 D& E- O, s. R2 U3 ]

: Y. m+ w  K  f6 F4 Y- `如果明胶粉末比较纯的话,0.2%的浓度应该不会很浑浊的,1%的浓度就会浑浊一些,跟PBS比较一下,就会发现区别的。一般高压过后,都会充分溶解的!
作者: sdjjfangfang    时间: 2013-7-7 09:59

回复 开心果王 的帖子
/ k/ d' A0 x# j8 L! h; a% k' y) r2 m8 f6 a9 ?
谢谢。我们买的是sigma的明胶,高压溶解的应该还算很充分了,不知道为什么




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