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标题: 大家看看这是污染了吗？M16胚胎培养液。 [打印本页]
作者: kiesheep    时间: 2010-5-21 00:31     标题: 大家看看这是污染了吗？M16胚胎培养液。

新的M16有这样的杂质，污染了吗？; D4 _1 S1 @5 s6 o( o2 U  L3 G
像是一片片的组织块啊。。。& l3 X- F5 n7 X$ E

5 i: W7 X* @, r' S1 Q胚胎经注射后经过夜培养都能从透明带中孵出，发育正常啊～～1 y' W) F. _; F& b  D' w
新的M16有这样的杂质，污染？ 新的M16有这样的杂质，污染？ 新的M16有这样的杂质，污染？

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作者: dyswgy    时间: 2010-5-21 03:38

放大倍数？为何看不到细胞结构？
作者: mzyysmile    时间: 2010-5-21 07:58

背景很杂，似乎有很多点状的物体，是照相的问题？还是培养液的污染？
作者: exin11    时间: 2010-5-21 08:59

不好说，可能是污染，也可能是细胞碎裂。
作者: decloud2009    时间: 2010-5-21 11:26

如果说细胞碎裂，数量是不是太多了点啊，
作者: wgydys    时间: 2010-5-21 13:59

1.从第2和第三张图看象是污染，0 r0 A1 _4 ~4 P. |6 C5 F
2.如果培养液混浊，那就肯定污染了
: a" U8 N# E9 D3.为何三张图都看不见细胞结构。
作者: janeyu    时间: 2010-5-22 16:33

第三张的图中长长的黄色条应该是纤维物质，有可能是棉花，前两张图看上去像是细胞碎片。
作者: cony    时间: 2010-5-22 20:06

楼主应该是没有照胚胎。上面只是纯M16培养液。这种物质很像是血清里面的东西，但肯定不是污染，血清里面杂质较多，但不影响其使用效果。我想这个应该跟血清里面的东西相似。
作者: kiesheep    时间: 2010-5-23 00:54

嗯嗯！！没有把胚胎也照上。
, Q/ j* y- i4 e6 U9 Q6 a都是新鲜培养液取出后，覆盖上胚胎用的石蜡油，经过大概30min 37℃培养箱平衡后拍的照片。
作者: kiesheep    时间: 2010-5-23 00:59

图片放大倍数依次为：
+ d/ L$ i6 ^. U$ _! O" t10x5
5 H/ `" g% p& n6 ^. w* N. S10x10
  {4 D/ O- A# z$ d10x20$ v- ~3 Q5 ^! U4 D: x
回复 2# dyswgy
作者: kiesheep    时间: 2010-5-23 01:01

背景的一点点和圈圈是摄像头张霉菌了，不是培养液里的。因为移动培养皿时那些点点不会移动的。回复 3# mzyysmile
作者: kiesheep    时间: 2010-5-23 01:03

回复 5# decloud2009
, ?* B( z! P5 a1 |* w) E1 I* g4 p& D$ s5 n+ x7 T7 U* X0 [- Q
对啊～细胞还没开始培养呢。。。。
作者: kiesheep    时间: 2010-5-23 01:05

回复 6# wgydys
. }6 [; f+ r" U, l( [$ X! A4 |% E( W0 ]. Y9 e8 |: e
培养液一直放在4℃，没有浑浊现象。
# ~- k! G/ L4 F& Y$ s
1 Q6 ?  X2 s8 O' n' g2 C不过很多表面泡泡！！！是否和这个有关？？
作者: kiesheep    时间: 2010-5-23 01:07

回复 7# janeyu
( x$ A% M) M3 ^
/ {# Y- s$ S1 _$ r. Y) {嗯，第三张那个是棉花纤维。
作者: lxl069    时间: 2010-5-23 21:03

石蜡油质量如何，纯吗？应该要用培液或PBS洗的才能用哦。市场也有卖现成过滤过的石蜡油。
作者: kiesheep    时间: 2010-5-23 22:27

回复 15# lxl069
% q7 }- b! `$ g
$ r' m3 s2 P# r4 T( w石蜡油是sigma买回来可直接使用的。
' X+ p1 L' ]0 t! F& DM16在未加石蜡油之前已经有未知的杂质，应该与石蜡油没关系。
作者: xbs530515    时间: 2010-5-26 23:02

没有看到过这种污染的东西，个人感觉不是污染，具体要判断，可以观察是否会增多，污染的话肯定会增殖的很快，如果可以，换液试试
作者: youyou315    时间: 2010-5-28 18:40

回复13＃ kiesheep
) ?6 `* u% |* Y- D; ~我曾经在M2中看到过类似的东东，可能是M2或者M16中含有BSA，剧烈晃动之后会有很多泡沫，观察到的碎片可能与之有关。建议：
* d, ?+ X2 T/ |' h" G1 h: |将M16平衡4小时以上再观察，有时平衡时间太短（楼主只有30min？）也会出现碎片。如果是细菌之类的污染，4小时后会很明显了。如果还有许多碎片，可以将M16过滤后再使用。我曾经就这样用过，呵呵。
作者: kiesheep    时间: 2010-5-29 00:10

本帖最后由 kiesheep 于 2010-5-29 00:14 编辑
2 d! T# G) v& Y$ R  z
  B1 U; e: k+ J% `回复 18# youyou315
. a+ S/ }! `7 _0 `( j+ S  x* \嗯嗯嗯！！十分感谢！！！
0 _# f/ T3 }# r8 [) j( R; u2 C% K; j  R
我现在怀疑也是由于剧烈晃动！因为培养液送来的时候有很多泡泡！证明曾经被晃动过。
. }  {& B0 `6 R- G最近有一次做了培养滴才发现没有胚胎，然后过了两天再做，培养滴留着用。
  l) s) h" n: W5 v& Z" p( f: x发现液滴非常的干净！！8 a, P1 O2 h8 t- z
不知道培养滴过夜制作会不会不好呢。。6 z( R* I# w; V# b. s' f9 \9 y

, o/ [2 ?6 h2 @/ l6 z* L那些杂质如果是BSA的释出物，过滤就会将其过滤掉啊，不会对胚胎不好么？？$ Y  d1 @, l2 z& f& W5 R: c

8 r8 n/ F5 }  E4 s: x其实如果买回来的一大瓶培养液污染了，可否用过滤这个方法补救？？+ D8 U8 t/ v) @1 m/ l
6 {( k% v2 z- g. o
不好意思。。比较多问题。。。
作者: leestone    时间: 2010-5-30 18:05

有時候Sigma的品質管理不太好
1 V) J/ E+ o( \/ p$ l& u就退貨吧～
, g+ ~- h% Y# o; b3 O沒辦法的話過濾應當也是可以用的
* w* A( |, O( p9 m7 {) y! R! K別忘了兩週到一個月內用完喔～
" q+ U* u4 y) H5 G: J8 J/ Z4 {6 p  h6 r2 Y
其實養胚胎建議使用KSOM-AA為佳
作者: kiesheep    时间: 2010-5-31 17:12

回复 20# leestone
3 U- j0 _9 O+ |9 u2 X7 t! z/ Y, g+ [0 X1 o  P" [/ j
！！！一个月之内用完？！用不了这么多吧。。。
) ~. L+ }: g$ d5 z嗯嗯！！ksom十分值得考虑！！
作者: initiation    时间: 2010-6-1 12:34

细胞的形态不太好，感觉像要凋亡了。而且medium内有杂质。
作者: kiesheep    时间: 2010-6-1 20:26

回复 22# initiation $ W* L2 k( o1 t

! t2 z6 }' {9 V* j" E* ~: I9 O" f$ [! ?这个还没加细胞进去的。。。只是培养液的杂质～～
作者: lixiaomei    时间: 2010-6-3 16:25

好像不是污染，因为细胞密度太小，不能接触生长，导致分化严重以致死亡，状态就是如此
作者: kiesheep    时间: 2010-6-3 22:11

回复 24# lixiaomei 3 _1 j" x  {  n. X9 B! K$ R
4 w2 l% T5 D( e- r3 |; O
这个还没加细胞进去的。。。只是培养液的杂质～～
作者: hanchao    时间: 2010-6-3 23:25

我觉得小微粒像是污染呢~如果是污染你可以通过小微粒的三点特性区别是否是污染： 分布均匀性，形态，及运动型。污染后的小微粒是会游动的。仔细观察看的到。



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