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标题: 请教：有关神经干细胞条件培养基的问题 [打印本页]

作者: dingyx2009 时间: 2010-5-30 22:10 标题: 请教：有关神经干细胞条件培养基的问题

刚开始做干细胞的实验，看了一些文献，培养神经干细胞的无血清培养基，有人用：DF12+N2 1%+BFGF20ng/ml+EGF20ng/ml；
或DF12+ B27 2%+BFGF20ng/ml+EGF20ng/ml；
或DF12+N2 1%＋B27 1%+BFGF20ng/ml+EGF20ng/ml。" k+ k* a8 Q( W& G5 o
' B3 Q5 K3 M% x p! a2 e2 q
就特别想知道对N2和或B27的选择依据是什么？它们在神经干细胞的生长发育过程中所扮演的角色有什么异同？

作者: 待鹤 时间: 2010-5-31 09:11

参考这篇文献该文献比较了几种不同的基础培养基和辅剂的组合。发现在Neuralbasal+B27或者DMEM/F12+BIT9500中细胞扩增最好。 V V& o- g) J Q! ^+ z5 w
[attach]8516[/attach]

作者: xfyang2007123 时间: 2010-5-31 23:36

有文献说，B27包含N2的所有成分，所以只用B27即可。而还有文献说原代培养用B27，传代用N2较好。

作者: dingyx2009 时间: 2010-6-2 20:42

回复 2# 待鹤 * N' c5 T4 p1 }; z* F
# O1 `1 Z. ~' Q5 e4 z* B
万分感谢，很不错的一篇文献。

作者: dingyx2009 时间: 2010-6-2 20:44

回复 3# xfyang2007123 # q8 Q9 G% e/ H6 H) I- G. h
, P4 i- p6 ^$ K. @6 W
当时N2和B27都订了，试试你说的方法。学习了。

作者: cortex 时间: 2010-6-3 15:38

B27成份比N2复杂，B27包括：Biotin，L-Carnitine，Cholesterol，Corticosterone，Ethanolamine，D(+)-Galactose，Glutathione (reduced)，Lecithin，Linoleic Acid，nolenic Acid，Phosphatidylcholin，Progesterone，Putrescine，Retinol，Retinyl Acetate，Sodium Selenite，T3 (Triodo-I-Thyronine)，DL-α-Trocopherol (Vitamin E)，DL-α-Trocopherol Acetate，Proteins:Albumin, bovine，Catalase，Insulin，Superoxide Dismutase，Transferrin。
主要用途：血清替代品；海马神经元生长；多种CNS神经元；神经细胞基础培养基的添加剂。添加后，神经干细胞主要向脊髓神经细胞方向分化。, t/ N0 M$ |" Y/ j1 n
N2成份相对简单，Human Transferrin (holo)  500.00
                     Insulin (Bovine)             500.00
                     Progesterone                   0.63
                     Putrescine                      1611.006 w+ m( ?1 I0 J* [
                     Sodium Selenite                0.524 S( O! H6 J4 @. ]9 U' p+ Q
看你养细胞的目的，最好添加N2，尽量不添加B27。

作者: meirongwan 时间: 2010-6-5 08:53

B27在神经干细胞诱导前三天用用DMEM/F12作培养基很便宜

作者: dingyx2009 时间: 2010-6-23 00:14

回复 6# cortex , ]# Y$ I; d8 S! Y

近来培养神经干细胞即用B27，又用N2。在相差显微镜下观察，发现和以前单纯用B27培养的神经干细胞还是有区别的，B27培养的干细胞背景干净，细胞大小相对均一，而加入N2培养的干细胞，总感觉有很多的单细胞和细胞碎片。可能在我的实验我还是倾向于单用B27。

作者: cortex 时间: 2010-6-24 14:17

当然，这个得根据你得实验。这个很好理解，B27的成份明显比N2复杂。这不过有报道称，经B27扩增后细胞的分化潜能会下降。所以这个你也得考虑。

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