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标题: 原代取小鼠的MEF培养，培养基中悬浮如图所示的细胞 [打印本页]

作者: wky98 时间: 2010-6-28 16:32 标题: 原代取小鼠的MEF培养，培养基中悬浮如图所示的细胞

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原代取小鼠的MEF培养，培养基中悬浮如图所示的细胞，但不知道是啥细胞，不是肝细胞吧

作者: wky98 时间: 2010-6-28 16:34

红细胞？

作者: wangzhuo822001 时间: 2010-6-28 18:37

红细胞吧～～环形中空～～

作者: wangzhuo822001 时间: 2010-6-28 18:38

好像还有白细胞呢～～怎么只看到有这些细胞噢，成纤维细胞呢？

作者: zsc78 时间: 2010-6-28 20:49

悬浮的是红细胞，成纤维细胞在下面贴壁生长。好像细胞状态不是太好。

作者: xjya 时间: 2010-6-28 20:59

内脏都要去除的，怎么会还有肝细胞呢？是不是漂洗得不干净啊，所以一些血细胞混进来了。
建议赶紧换液，看看能不能补救。

作者: ambassador 时间: 2010-6-28 21:19

悬浮的是红细胞，成纤维细胞在下面贴壁生长。好像细胞状态不是太好。
6 _" G2 O* M |zsc78 发表于 2010-6-28 20:49

+ A3 d; R4 n& W# J- n' \& \
谢谢你的分析，楼下说有白细胞和肝细胞？能分别指出来吗？

作者: zsc78 时间: 2010-6-28 21:27

呵呵，没有看出来哪里有肝细胞。取胚胎总是或多或少的有些血液没有洗干净，应该影响不大。你的细胞主要是状态好像不好，也许是放大倍数较高的原因。

作者: mqz_11 时间: 2010-6-28 22:22

应该也是MEF细胞，只不过死了。。可能是原代处理不太好。。要么就是。。培养基不太对，，促使细胞生长贴壁不好。。。

作者: xbs530515 时间: 2010-6-29 19:43

应该是红细胞，如果是其他的贴壁细胞状态不好未能贴壁的话，不会有这么圆亮，只看过红细胞有这么圆亮的，换液就可以去除了，不影响

作者: xjya 时间: 2010-6-29 20:14

本帖最后由 xjya 于 2010-6-29 20:17 编辑
1 q) s! B C6 e" z' ~
回复 7# ambassador & W8 E/ ^- {7 O7 A, R
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肯定没有肝细胞，因为内脏是要去除的。悬浮的是血细胞（多数是红细胞）。图中左上角的贴壁细胞是MEF。但是由于图片聚焦在悬浮细胞上，看不清楚贴壁细胞的状态，不过从图中看贴壁细胞数量不多。建议上低倍镜聚焦在贴壁细胞层的图。

作者: xjya 时间: 2010-6-29 20:24

回复 7# ambassador ! B# @3 j+ n+ q- h1 v

肯定不会有肝细胞，因为内脏是要去除的，很容易去除干净。图中悬浮的多是红细胞。左上角贴壁细胞应该是MEF，但是由于图聚焦在悬浮细胞上，看不清贴壁细胞的状态，但是看来贴壁细胞数量不多。建议上低倍镜聚焦在贴壁细胞层的图。

作者: wky98 时间: 2010-6-30 09:05

数码相机拍的，成纤维细胞不是很清晰。如图所示，成纤维细胞状态是不是好差呢？怎么看啊？

作者: friendly0722 时间: 2010-6-30 09:15

从上面的图看，细胞确实长的不好，首先原代成纤维细胞体积应该小了比较好，折光性也应该较好。

作者: wky98 时间: 2010-6-30 09:24

再传三张

作者: wky98 时间: 2010-6-30 09:42

还有几张，帮忙分析分析

作者: anxjs 时间: 2010-6-30 12:04

悬浮的是血细胞，以红细胞为主，前面的照片倍数太高，看不出来细胞状态，看最新发的图片，有些图片上细胞是还可以的，必定其他组织不太可能完全去除干净，因此细胞形态也不会很规则，而且不同小鼠品系，其MEF形态也有差别。主要看细胞增殖怎么样，如果很好，不必去计较有没有肝细胞等其他细胞在内。

作者: cortex 时间: 2010-6-30 12:15

看你的细胞形态，可以做两种判断：一是你消化的时间问题。里面悬浮的都是死细胞，看它的折光性就知道了，如果是活细胞，细胞边缘发亮。二，细胞可能支原体污染，我以前有一次做的MEF被支原体污染和你的图片十分相似。不过，别人给你的意见只能参考，可能有误，具体的还得你自己判断和证明。

作者: cortex 时间: 2010-6-30 13:46

污染也是后来才知道的，胚胎干细胞长不好才找的原因。因此没有照照片。至于饲养[attach]9934[/attach]层照片，几乎从来没照过。应楼主要求，找了好半天，才找到几张很早以前找的，不过也不是很好，不过可以给你做个参照吧。这个是小鼠MEF.

作者: xjya 时间: 2010-7-1 10:11

回复 15# wky98
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看上去还行啊.就是杂质太多.要换液.( q6 _. l/ g" O! ]5 Z
另外这三张照片是同一皿细胞不同时间拍的吗?如果是那就说明细胞增殖能力还不错.最后那张的细胞可以传代了.

作者: wky98 时间: 2010-7-1 11:20

是的

作者: wky98 时间: 2010-7-1 11:20

是不同时间拍的

作者: iseeyou1210 时间: 2010-7-1 19:56

回复 6# xjya
8 V3 x. [7 ?8 [9 {3 t" l# Y: Q
我从来都没有去内脏，在换液以后，死细胞都可以去除。
lz做的这个MEF的原代培养很糟糕，太稀了。( R7 l4 v. z' x# e' a9 A
我一般一个E13.5的embryo，放在一个T25或者一个T75里面。

作者: iseeyou1210 时间: 2010-7-1 19:57

这个细胞可不可能是没有去核的红细胞。

作者: yuangaoqian 时间: 2010-7-6 18:09

想问你一下，这是培养多久的细胞，我们培养的大鼠胚胎成纤维细胞中也有一些球形的细胞，但是贴壁生长，边缘折光性强，胞质致密，怀疑可能是血管来源的细胞。此外，还有一种跟你的相似，不贴壁，但好像粘在底层细胞上生长。

作者: wky98 时间: 2010-7-9 09:08

回复 25# yuangaoqian / X" l: b9 P- u9 K; N

6 S* Y( I, M. e0 b2 R
这是圆的细胞是培养原代细胞的时候有的，传代后，就基本没有了

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