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标题: 低氧对间充质干细胞的影响 [打印本页]

作者: 文献管理员 时间: 2009-3-3 11:51 标题: 低氧对间充质干细胞的影响

作者：何觅春　李静　赵春华作者单位：中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院组织工程研究中心，北京 100005 # `% [7 }/ I+ f; L, e- |" v" \( p
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      【摘要】  　　氧对于几乎所有的生命都是必需的，它维持能量代谢及细胞的功能，但机体多种细胞是处于生理或病理性低氧状态中，而体外细胞实验一般是在20％氧浓度下进行，并不符合生理状态。直到最近，关于低氧对于间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSC）的影响有了一系列的研究。体外实验表明，适度低氧下MSC的生长和存活能力更好，氧浓度可以影响MSC向成骨、成软骨、成脂的分化倾向，低氧能提高特异性受体和配体相结合所介导的迁移。低氧可影响胚胎干细胞、造血干细胞、神经干细胞的生理学特性也是一证据。干细胞对缺氧反应的分子机制主要涉及低氧诱导因子1 (hypoxic inducible factor1，HIF1)信号通路。本文综述了低氧对MSC的存活、增殖、分化和迁移的影响，以及涉及HIF1等的分子机制。
      【关键词】低氧；间充质干细胞；细胞增殖；细胞分化；细胞迁移  D; k+ v% _+ x( J: o) C
   　　 Effect of Hypoxia on Mesenchymal Stem Cells ——Review6 A4 b& z& a0 C, `7 O3 S

HE MiChun, LI Jing, ZHAO ChunHua" y* d2 b+ S2 p$ g  j6 s

Center of Tissue Engineering, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences， School of Basic Medicine Peking Union Medical College, Beijing，100005, China
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AbstractOxygen is issentialfor life，but cultivation of cells is usually performed under 20％O2 , that do not replicate normal physiological hypoxia or pathological hypoxia conditions in the body. Recently, the effect of hypoxia on mesenchymal stem cells (MSCs) has been studied, under physiological hypoxia, MSCs thrive well, and the abilitydifferentianing to osteoblast, chondrocyte andadipocyteas well as the ability of migrationare changed. Hypoxia changes the physiological characteristics of embryonic stem cell, hematopoietic stem cell and neuron stem cell as well. The mechanism of these responses might be primarily involved in the hypoxic inducible factor1 (HIF1) signal pathway. This review emphasizes that hypoxia is an important factor onall major aspects of stem cell biology including survival, proliferation, differentiation, and migration, and the mechanism involved in HIF1 signaling pathway behind these responses was also discussed.

Key wordshypoxia; mesenchymal stem cell; cell proliferation; cell differentiation; cell migration9 y+ v7 i; T% P  g5 g4 `0 [% r
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J Exp Hematol 2007; 15(2):433-436

间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）具有强大的自我更新及多系分化潜能，体内移植后可以迁移至损伤的部位（多数为缺血缺氧的环境）修复相应的组织。干细胞体外增殖分化的研究通常是在20％O2的条件下，然而体内氧浓度显著低于此值，动脉血氧浓度约为12%，组织的平均氧浓度约为3%,MSC的主要积聚部位骨髓的氧浓度为1%-7%, 富集干细胞的胚体氧浓度更低，而且处于一种动态变化之中。通常所谓的低氧更符合生理状态，过高浓度的氧对细胞反而具有损伤应激作用。除生理性低氧外，机体经常会有病理性低氧的发生，如心肌梗塞，脑卒中等，这时相应的组织细胞处于缺血缺氧的状态中，尽管缺血的组织氧和营养都不足，但缺氧可单独影响细胞的生理学特性。那么在低氧下，MSC的存活、增殖、分化，以及迁移能力有什么样的变化呢？( [5 T! f' M# h4 n

低氧对间充质干细胞凋亡和存活的影响
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干细胞移植研究是一大热点，但移植到缺血的部位后不是所有细胞都可以存活。实验证明，适度的低氧并不引发MSC凋亡。虽然Geng［1］将MSC注射到发生心肌梗塞SCID小鼠的心室，4天后99%的MSC死亡；Zhu等［2］将MSC置于低氧（3％O2）及无血清的条件下（模拟缺血环境）培养，细胞中caspase3(半胱天冬蛋白酶3)活性增高，发生依赖caspase的凋亡，但单独的低氧条件不能增高caspase3活性，诱导凋亡的效应不明显，只是能提高无血清诱导的凋亡效率。此研究结果表明，MSC对缺血缺氧的环境敏感，但导致其凋亡的主要因素不为低氧。Follmar等［3］发现,在0.1% O2（极度低氧）下兔来源的干细胞死亡增多，但他们同时证明在有限的氧浓度下干细胞依旧可以存活。Greijer等［4］的实验表明,缺氧的严重程度决定着细胞凋亡或者适应缺氧而存活， 0.5％ O2可以启动细胞的凋亡，从而阻止低氧诱导突变的积累，在此过程中存在着复杂诱导凋亡和抗凋亡间的平衡，涉及低氧诱导因子1（hypoxic inducible foctor1, HIF1）与多种因子的结合，如胚胎干细胞在0.5% O2的条件下，HIF1诱导VEGF表达升高，若抑制VEGF的表达，细胞凋亡数增加10倍［5］。用适当的基因修饰后，MSC对缺血缺氧的耐受力提高。缺血的组织中缺氧/再灌注、炎性因子、诱导凋亡因子等是导致细胞死亡的因素，而HO1（血红素加氧酶）是抑制这些因子的关键成分。将转染HO1基因的MSC及对照组细胞移植入发生急性心肌梗塞的小鼠心脏，7天后实验组的移植细胞存活率比对照组高3倍［6］。而Akt1（蛋白激酶B）修饰的MSC也能更好的存活于缺血缺氧的环境，可有效抑制大鼠缺血心肌的重塑，完全纠正心脏的舒缩功能，修复的心容量比未用Akt1修饰的MSC所修复的高4倍［7］。

中国实验血液学杂志J Exp Hematol 2007; 15(2)低氧对间充质干细胞的影响低氧对间充质干细胞增殖和原始状态9 z. Q- a9 q( o$ x# n% G

的影响MSC主要来源于骨髓，骨髓是一典型的低氧环境。体外实验证实，低氧可抑制MSC分化而有利于增殖。D′Ippolito等［8］将骨髓来源的多能成体干细胞于3%氧浓度下培养3天后，数目比21%氧浓度下培养7天多3倍。Grayson［9］将人来源的MSC于2% O2 条件下在三维支架中培养1个月，与20% O2相比，低氧下的MSC有一延长的停滞期来适应培养条件，然而在随后的培养期间一直处于增殖状态，产生集落形成单位的能力显著增高，且干细胞标志性基因表达水平更高。Bosch等［10］分离培养猪来源的MSC，同样发现其在低氧条件下增殖能力增强。% x3 r) Z5 u( n: k- C$ q
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低氧可维持关键性干/祖细胞因子pref1（前脂肪细胞因子）的表达［11］。另有实验表明，低氧培养条件下MIAMI (marrowisolated adult multilineage inducible) 细胞OCT4、REX1、 SSEA4（胚胎阶段特异性抗原4）mRNA的表达比常氧下高，端粒逆转录酶的活性增加，即使在成骨诱导条件下，低氧使成骨标志性基因的表达受到抑制，而干细胞标记物的表达没有改变［8］。Lennon等［12］将培养的原代或者第一代大鼠MSC移植入同基因受体鼠，与常氧下培养相比，低氧下培养的细胞在体内表现出更强的成骨能力；Xie等［13］证实，MSC经低氧预处理后更易向心肌样细胞分化。这些研究者推测，低氧是保持干/祖细胞未分化状态的重要因素，可促进这类细胞增殖而保持多能性，MSC在低氧的环境中能维持自我更新的能力，而接近血管处于高氧环境时，才倾向于分化。另一方面，标准的培养技术最初用来培养纤维母细胞，而对其他细胞有应激损伤作用。MSC在体内处于低氧环境中，因而对高氧应激敏感，在21%氧浓度下培养的细胞比5% 氧浓度下培养的细胞产生更多的氧化产物，对生长不利［14］。由此认为，用于移植的MSC适于在合适的低氧环境中扩增。. G: d6 F+ \3 b( v, Q+ I# j) y  Y6 G

低氧对间充质干细胞分化的影响$ I/ Z; i+ }2 P. L
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大量的研究表明，氧浓度可以调节成软骨的发育、神经干细胞的分化、胎盘滋养层等的分化［15-19］。同样，低氧对MSC的分化有着深刻的影响。
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低氧对间充质干细胞向软骨分化的影响

体内软骨也是处于一种氧浓度低于平均水平的环境，关于低氧对MSC向软骨分化的作用，目前体外实验的报道结果并不一致。Wang等［20］将人MSC置于5%和20% O2浓度下向成软骨诱导，低氧下细胞分泌大量软骨相关的基质分子，包括II 型胶原和硫酸软骨素，胶原合成率比常氧下高3倍。此结果表明，MSC在形成软骨过程中，氧浓度对其代谢具有重要的调节作用，在软骨组织工程中，外源性氧浓度的控制可影响基质分子的沉积。但Malladi等［21］在体外用三维培养模型添加诱导因子以诱导MSC向软骨分化，结果发现置于2% O2比置于21% O2下向软骨分化率低。这种不一致结果的报道，可能是因为不同的实验室使用的细胞以及培养条件有所差异。
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低氧对间充质干细胞成骨分化的影响# M+ s+ p/ v" x, O# F: e
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将可多系诱导的成体干细胞向成骨诱导，21%氧浓度条件下成骨细胞标志性基因骨钙蛋白（osteocalcin）、骨涎蛋白（bone sialoprotein, BSP）、osterix、Runx2及碱性磷酸酶（ALP）的表达或活性上调，然而在3%O2条件下这些基因及蛋白的上调被阻滞，而干细胞标记物的表达却没有改变; 同样，在成骨诱导条件下长期培养时21%O2浓度下矿物质沉积很明显，但在低氧下 (3%O2)矿物质几乎检测不到，其他一些研究者得到一致的结果［8，21，22］。这些研究者推测，在体外低氧更接近生理状态，有利于MSC的增殖而抑制分化。5 F6 M( {. h7 W7 @7 s# ?

低氧对间充质干细胞成脂分化的影响

Lee等［23］将MSC培养于2% O2条件下，与19.5％O2的条件相比较，MSC向脂肪细胞分化能力降低。Yun等［19］使用3T3L1 脂肪前体细胞研究发现，在0.01％和2％ O2条件下， HIF1上调 DEC1/Stra13的表达，从而抑制调节脂肪生成的主要基因过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferatoractivated receptor γ2，PPARγ2）启动子的激活，导致了成熟脂肪细胞形成受阻。Fink 等［24］发现了一个有意思的现象是，不加诱导因子条件下将人MSC 置于1%O2下培养，24小时即可见脂滴的形成，相比较20%O2浓度下加诱导剂，脂滴小而分布均匀；而氧浓度高于2%时，72小时也未见脂滴出现。但在1%O2下，过氧化物酶体增殖物激活受体γ2和脂肪细胞定向和分化因子/类固醇调节元件结合蛋白1c（adipocyte determination and differantiation factord/sterol regulatory elementbinding protein 1c, ADD1/SREBPK）并没有受到诱导，而且也未影响早期和晚期标志性基因脂蛋白脂酶（LPL）和aP2的转录，同样，检测不到成熟脂肪细胞的特异性基因瘦蛋白 (leptin)、和脂肪细胞分化相关蛋白(adipophilin)的表达，只是检测到饥饿诱导脂肪因子（PGAR）表达增高，但PGAR并非只在缺氧下表达，故不是成脂的特异性基因。此结果说明尽管有脂滴的聚集，但没有真正意义上的向脂肪细胞分化，据此推测成脂分化可能存在依赖和非依赖PPARγ2的两种途径。此实验还检测到，细胞周围氧浓度即使有很微小的变化，基因的表达就有差异。/ F* [/ K+ v3 G$ R3 r7 {. d
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低氧对间充质干细胞迁移的影响
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MSC在移植后能够在体内向损伤部位迁移，这种迁移可能涉及多种配体和受体间的相互作用，如基质细胞衍生因子1（SDF1）与其受体CXCR4，CD44与透明质酸(HA),血管内皮生长因子（VEGF）与血管内皮生长因子受体1（VEGFR1）等［25-27］。Okuyama等［25］将小鼠MSC以1%O2预处理24小时或转导基因稳定表达HIF1,促进了VEGFR1的表达，提高了VEGFR1与VEGF和PLGF（胎盘生长因子）相结合所介导的迁移，迁移率与VEGF和PLGF浓度成正比。抑制HIF1的表达，VEGFR1的表达降低，MSC 向加有VEGF和PLGF的小室迁移减少。在这个实验中用VEGF和PLGF处理细胞并不能刺激其增殖，因为增殖信号来自于VEGFR2与VEGF相结合，小鼠并不表达VEGFR2，说明迁移的增高是因VEGFR1表达的增高所致。Bhakta等［28］的实验表明，转导了CXCR4之后，MSC向SDF1的迁移在3小时提高3倍，6小时提高5倍。而缺血的组织在HIF1的直接调控下表达高水平的SDF1，从而募集滞留循环中表达CXCR4的干细胞［25］。故低氧可能对MSC和相应的组织同时具有调节相应分子表达的作用，从而提高多能干细胞向缺血部位的迁移。9 }5 ~1 ^3 ~' {9 W/ P' J5 l* v

低氧对HIF1等信号通路的调节, t9 {9 f+ n) B7 u
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氧浓度对细胞生理特性的影响必然有其分子机制。低氧下，细胞的主要反应之一为HIF1的稳定性升高，这时HIF1可结合并激活一系列缺氧反应元件，如VEGF等。HIF1是由转录因子HIF1α和组成性表达的芳香烃受体核转运蛋白（ARNT）所组成，在氧浓度升高时，脯氨酸羟化酶的活化使HIF1α被羟基化修饰，羟基化的HIF1α可被pVHL（希佩尔林道蛋白）识别，结合并泛素化而降解。HIF2α也是受氧气调节的关键因子，与HIF1α具有相当大的同源性，但它们调节不同的靶基因。低氧不仅调节HIF，还导致其它多种转录反应、转录后修饰、细胞蛋白定位的改变。低氧诱导的信号通路涉及血管生成、糖酵解、生长因子信号、永生化、基因的稳定性、pH调节等重要的生物学过程［29-32］（附图）。
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结语) r" S/ g: j: O. ]6 Q  |6 s) p

低氧是一种重要的生理和病理现象，在不同氧浓度下，MSC具有不同存活能力、增殖潜能、分化倾向以及迁移能力。目前，低氧对MSC分化影响的研究主要集中在向成软骨、成骨、成脂方面，对其向其它类型细胞分化的影响未有报道；关于低氧影响MSC迁移的分子机制研究得也不够充分，这些方面有待深入探讨；另一方面，探索究竟什么样的氧浓度最有利于MSC的培养、扩增，这方面的研究将为临床移植提供重要的参考依据。" X" |& P5 h2 x
      【参考文献】8 U( Y" Q; B6 j' v0 q
1Geng YJ. Molecular mechanisms for cardiovascular stem cell apoptosis and growth in the hearts with atherosclerotic coronary disease and ischemic heart failure. Ann NY Acad Sci, 2003;1010:687- 697) r! s9 p# ]6 R
0 j& f5 v# Z. ]: a

8 j4 W  {- y  Q' C
2Zhu W, Chen J, Cong X, et al. Hypoxia and serum deprivationinduced apoptosis in mesenchymal stem cells.Stem Cells, 2006;24:416-425

- F6 v7 \0 q0 j( Z

3Follmar KE, Decroos FC, Prichard HL, et al. Effects of glutamine, glucose, and oxygen concentration on the metabolism and proliferation of rabbit adiposederived stem cells. Tissue Eng, 2006;  ［Epub ahead of print］' }+ L' y0 q4 p: P7 K, i/ y
5 c! Z) p% U0 d5 r, J: F+ w
1 |" v" ~% W5 Q3 n# ~# Q+ q7 f% ~
% C& L6 c& Q; @3 i; b- @
4Greijer AE, vanderWall E. The role of hypoxia inducible factor 1 (HIF1) in hypoxia induced apoptosis. J Clin Pathol, 2004;57:1009-1014
" A  ~" w  h' @9 G9 B( B

5 R' q5 `: T! ?/ ~8 \& @
5Brusselmans K, Bono F, Collen D, et al.  A novel role for vascular endothelial growth factor as an autocrine survival factor for embryonic stem cells during hypoxia. J Biol Chem, 2005;280:3493-3499

6Tang YL, Tang Y, Zhang YC, et al. Improved graft mesenchymal stem cell survival in ischemic heart with a hypoxiaregulated heme oxygenase1 vector. J Am Coll Cardiol, 2005;46:1339-1350
/ x! E) |- S  l* _6 `8 i0 @( W& E

, Z6 \$ U, Z1 P0 x2 _/ ?2 _# A
7Mangi AA, Noiseux N, Kong D, et al. Mesenchymal stem cells modified with Akt prevent remodeling and restore performance of infarcted hearts. Nat Med, 2003;9:1195-1201

, p9 Z( g+ p0 w2 g

8D′ Ippolito G, Diabira S, Howard GA, et al. Low oxygen tension inhibits osteogenic differentiation and enhances stemness of human MIAMI cells. Bone, 2006;39:513-522

% |5 z$ W4 o* a8 D# K

9Grayson WL, Zhao F, Izadpanah R, et al.  Effects of hypoxia on human mesenchymal stem cell expansion and plasticity in 3D constructs. J Cell Physiol, 2006;207:331-339$ u' _) T2 z! m9 b  J. A# v5 _

: ]3 s+ s% C) Z

10 Bosch P, Pratt SL, Stice SL. Isolation, characterization, gene modification, and nuclear reprogramming of porcine mesenchymal stem cells.  Biol Reprod, 2006;74:46-57: b7 ^5 `; P$ Y! p. ^& b9 W

11Lin Q, Lee YJ, Yun Z. Differentiation arrest by hypoxia. J Biol Chem, 2006;281:30678-30683( @, `# e5 T  e9 G7 u3 {- z4 t- ?2 O

4 {3 ]. m. i/ @, p: R
12Lennon DP, Edmison JM, Caplan AI. Cultivation of rat marrowderived mesenchymal stem cells in reduced oxygen tension: effects on in vitro and in vivo osteochondrogenesis.  J Cell Physiol, 2001;187:345-355
5 e2 q' ]( }% }5 ~( e
0 N. r2 V1 e7 B
! L2 ?- D. z# D3 d& Q8 C- h
13Xie XJ, Wang JA, Cao J, et al. Differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells induced by myocardial medium under hypoxic conditions. Acta Pharmacol Sin, 2006; 27:1153-11586 b7 H: r% Y" u
6 X- I7 x8 {0 {

14MoussaviHarami F, Duwayri Y, Martin JA, et al. Oxygen effects on senescence in chondrocytes and mesenchymal stem cells: consequences for tissue engineering. Iowa Orthop J, 2004;24:15-20
; K! W* B. _' ~% Y6 p8 W
5 q+ E, t4 u, D
, @' A. ?0 U& q) `- h
15Genbacev O,  Zhou Y,  Ludlow JW, et al. Regulation of human placental development by oxygen tension. Science, 1997; 277（5332）:1669-1672

+ Y$ S* o& @# s6 A3 n

16Giaccia AJ,  Simon MC,  Johnson R.  The biology of hypoxia: the role of oxygen sensing in development, normal function, and disease. Genes Dev, 2004;18:2183-2194

7 y  w" d  k# h5 c- A  h2 s

17Schipani E,  Ryan HE,  Didrickson S, et al. Hypoxia in cartilage: HIF1alpha  is essential for chondrocyte growth arrest and survival. Genes Dev, 2001; 15:2865-2876: U3 |* D+ K+ z* P+ z) r* M
6 f. ~# ?5 W, ?4 H6 r: c  ~# m

* {2 Q: G" r' v9 X
18Studer L, Csete M,  Lee SH, et al. Enhanced proliferation, survival, and dopaminergic differentiation of CNS precursors in lowered oxygen. J  Neurosci, 2000; 20:7377-7383
. {$ [4 m% k3 w  w

19Yun Z,  Maecker HL,  Johnson RS, et al. Inhibition of PPAR gamma 2 gene expression by the HIF1regulated gene DEC1/Stra13: a mechanism for regulation of adipogenesis by hypoxia. Dev Cell, 2002; 2:331- 341/ |2 N( q/ a5 M4 Q! Z
8 C8 f/ |4 r: i0 x0 x# J4 s4 s8 ~
" B" X' a! r) w% [2 ^% j

20Wang DW, Fermor B, Gimble JM, et al. Influence of oxygen on the proliferation and metabolism of adipose derived adult stem cells.J Cell Physiol, 2005;204:184-191. E2 m' \1 R: k8 M

" @* \' N$ ?; L4 ^$ o; i. q
21Malladi P, Xu Y, Chiou M, et al. Effect of reduced oxygen tension on chondrogenesis and osteogenesis in adiposederived mesenchymal cells.  Am J Physiol Cell Physiol, 2006;290:C1139-1146, E0 n  p0 M' q% G% C4 A
+ n5 n1 _; W: U3 `- V' S
& B& `6 k/ N& ?# c
; _; T  ~1 P) y& }6 G6 E4 \' E+ O
22Lee JH, Kemp DM. Human adiposederived stem cells display myogenic potential and perturbed function in hypoxic conditions. Biochem Biophys Res Commun, 2006;341:882-888$ K# Y# c% w- B! \
/ L( y$ a- T  ^8 t9 K2 {0 N/ O/ p

23Utting JC, Robins SP, BrandaoBurch A, et al. Hypoxia inhibits the growth, differentiation and boneforming capacity of rat osteoblasts. Exp Cell Res, 2006;312:1693-1702

/ e9 w6 o0 G- r, X2 i9 P
24Fink T, Abildtrup L, Fogd K, et al. Induction of adipocytelike phenotype in human mesenchymal stem cells by hypoxia. Stem Cells, 2004;22:1346-1355

5 u! \( I  j1 U
25Okuyama H,  Krishnamachary B,  Zhou YF, et al. Expression of vascular endothelial growth factor receptor 1 in bone marrowderived mesenchymal cells is dependent on hypoxiainducible factor 1.  J Biol Chem. 2006;281:15554-15563; u% {! F+ @. Z% t" ?6 E
3 F) ?; W9 [1 m+ K8 a/ F# T

( P" {; u" J6 c% J8 l4 n! g5 K
26Ceradini DJ, Gurtner GC. Homing to hypoxia: HIF1 as a mediator of progenitor cell recruitment to injured tissue. Trends Cardiovasc Med, 2005;15:57-63# ]  b3 |) J% A! N
5 e7 E  F' x5 o

27Zhu H, Mitsuhashi N, Klein A, et al. The role of the hyaluronan receptor CD44 in mesenchymal stem cell migration in the extracellular matrix. Stem Cells, 2006;24: 928-935
3 K8 L- ^! I; ]+ h2 {
9 l2 N4 x, A3 {  Z) d, v3 L9 U9 G

28Bhakta S, Hong P, Koc O. The surface adhesion molecule CXCR4 stimulates mesenchymal stem cell migration to stromal cellderived factor1 in vitro but does not decrease apoptosis under serum deprivation. Cardiovasc Revasc Med, 2006;7:19-24

) x# Y+ F: ^6 y! g: z

29Csete M. Oxygen in the cultivation of stem cells. Ann NY Acad Sci, 2005;1049:1-89 e6 j5 [; h6 D- A/ Y: H4 G& M& k

/ r. d0 `4 ?+ _. ~7 n! S  Q

30Harris AL. Hypoxia-a key regulatory factor in tumour growth. Nat Rev Cancer, 2002;2 :38-47
& r) b+ L. i  i, y0 A

$ u0 H& C* q3 _, y
31Bracken CP, Fedele AO, Linke S, et al. Cellspecific regulation of HIF1alpha and HIF2alpha: Stabilization and transactivation in a graded oxygen environment. J Biol Chem, 2006;281:22575-225852 [; d1 |* h9 t4 ]) }9 A% @5 c
- u( X  a0 B! J1 Y8 E! }
* s  _, Z2 V! s

32Esteban MA, Tran MG, Harten SK, et al.Regulation of Ecadhe rin expression by VHL and hypoxiainducible factor. Cancer Res, 2006;66:3567-3575

作者: 陈晴 时间: 2015-6-4 16:02

我该不会是最后一个顶的吧

作者: txxxtyq 时间: 2015-6-20 19:10

一个人最大的破产是绝望，最大的资产是希望。

作者: yukun 时间: 2015-7-21 19:56

我来看看！谢谢

作者: 科研人 时间: 2015-8-29 21:51

看或者不看，贴子就在这里，不急不忙

作者: aakkaa 时间: 2015-8-31 05:53

嘿嘿

作者: 红旗 时间: 2015-9-14 19:21

今天没事来逛逛

作者: biobio 时间: 2015-9-15 10:27

孜孜不倦，吾等楷模 …………

作者: 泡泡鱼 时间: 2015-9-23 19:51

好贴子好多啊

作者: 大小年 时间: 2015-10-13 11:01

任何的限制，都是从自己的内心开始的。

作者: txxxtyq 时间: 2015-10-14 12:55

人之所以能，是相信能。

作者: tempo 时间: 2015-10-16 19:43

昨晚多几分钟的准备，今天少几小时的麻烦。

作者: foxok 时间: 2015-10-29 22:17

一楼的位置好啊..

作者: 剑啸寒 时间: 2015-11-9 16:35

很好！很强大！

作者: 泡泡鱼 时间: 2015-11-15 19:56

帮你项项吧

作者: txxxtyq 时间: 2015-11-28 15:27

必须顶

作者: MIYAGI 时间: 2016-1-14 15:01

顶下再看

作者: awen 时间: 2016-1-31 09:54

青春就像卫生纸。看着挺多的，用着用着就不够了。

作者: Greatjob 时间: 2016-4-2 19:32

一个子没看懂

作者: na602 时间: 2016-4-15 21:54

一楼的位置好啊..

作者: highlight 时间: 2016-5-15 22:53

我有家的感觉~~你知道吗

作者: pengzy 时间: 2016-5-21 17:42

不错不错.,..我喜欢

作者: 加菲猫 时间: 2016-7-13 16:10

我来看看！谢谢

作者: 陈晴 时间: 2016-7-19 16:43

我在顶贴~！~

作者: 再来一天 时间: 2016-7-28 13:10

dddddddddddddd

作者: MIYAGI 时间: 2016-8-10 09:01

今天再看下

作者: 蝶澈 时间: 2016-8-12 05:10

继续查找干细胞研究资料

作者: immail 时间: 2016-8-15 16:16

谢谢分享了!

作者: htc728 时间: 2016-9-10 19:09

嘿嘿

作者: aakkaa 时间: 2016-9-22 22:13

羊水干细胞

作者: vsill 时间: 2016-10-11 18:54

我在努力中

作者: DAIMAND 时间: 2016-10-29 16:34

我喜欢这个贴子

作者: 海小鱼 时间: 2016-11-3 15:27

在线等在线等

作者: heart10 时间: 2016-11-9 10:27

对不起，我走错地方了，呵呵

作者: biopxl 时间: 2016-11-14 12:01

呵呵大家好奇嘛来观看下~~~~

作者: lalala 时间: 2016-11-14 19:23

肌源性干细胞

作者: xm19 时间: 2016-11-28 14:27

不错不错比我强多了

作者: 兔兔 时间: 2016-11-29 08:43

老大,我好崇拜你哟

作者: dypnr 时间: 2016-12-11 16:11

真是佩服得六体投地啊

作者: doc2005 时间: 2017-1-10 13:42

感謝樓主干细胞之家真的不错

作者: 多来咪 时间: 2017-1-11 11:35

dddddddddddddd

作者: lalala 时间: 2017-1-31 19:28

ding 支持

作者: sshang 时间: 2017-2-7 16:17

支持你就顶你

作者: 心仪 时间: 2017-2-7 22:10

先顶后看

作者: popobird 时间: 2017-2-18 16:09

淋巴细胞

作者: 蝶澈 时间: 2017-3-13 22:35

干细胞研究还要面向临床

作者: 甘泉 时间: 2017-3-15 14:54

厉害！强~~~~没的说了！

作者: biopxl 时间: 2017-3-20 14:27

呵呵高高实在是高~~~~~

作者: 橙味绿茶 时间: 2017-3-20 20:58

好困啊

作者: dd赤焰 时间: 2017-3-28 05:10

这年头，分不好赚啊

作者: 蚂蚁 时间: 2017-3-31 20:42

不错的东西持续关注

作者: xm19 时间: 2017-4-6 03:34

家财万贯还得回很多贴哦

作者: sshang 时间: 2017-4-9 07:03

人之所以能，是相信能。

作者: 天蓝色 时间: 2017-4-23 09:02

应该加分

作者: lalala 时间: 2017-4-24 02:43

就为赚分嘛

作者: 考拉 时间: 2017-5-8 08:43

正好你开咯这样的帖

作者: nosoho 时间: 2017-5-14 15:01

很好！很强大！

作者: 3344555 时间: 2017-6-1 05:17

文笔流畅，修辞得体，深得魏晋诸朝遗风，更将唐风宋骨发扬得入木三分，能在有生之年看见楼主的这个帖子。实在是我三生之幸啊。

作者: 橙味绿茶 时间: 2017-6-14 20:27

支持一下吧

作者: wq90 时间: 2017-6-27 14:54

世界上那些最容易的事情中，拖延时间最不费力。

作者: 橙味绿茶 时间: 2017-7-9 16:42

干细胞之家

作者: 与你同行 时间: 2017-7-14 22:31

顶也～

作者: 依旧随遇而安 时间: 2017-7-25 19:34

我毫不犹豫地把楼主的这个帖子收藏了

作者: dypnr 时间: 2017-8-16 00:06

小心大家盯上你哦

作者: vsill 时间: 2017-8-16 15:43

声明一下：本人看贴和回贴的规则，好贴必看，精华贴必回。

作者: pcr 时间: 2017-8-27 09:17

今天再看下

作者: 舒思 时间: 2017-8-29 07:40

厉害！强~~~~没的说了！

作者: biopxl 时间: 2017-9-2 15:18

不错啊! 一个字牛啊!

作者: 与你同行 时间: 2017-9-21 02:19

有空一起交流一下

作者: happyboy 时间: 2017-9-28 14:43

人气还要再提高

作者: dongmei 时间: 2017-10-3 12:26

楼主good

作者: ines 时间: 2017-11-2 09:10

我在顶贴~！~

作者: doc2005 时间: 2017-11-13 14:17

天啊. 很好的资源

作者: 983abc 时间: 2017-12-10 00:41

不错，看看。

作者: Greatjob 时间: 2017-12-15 00:44

一个人最大的破产是绝望，最大的资产是希望。

作者: dogcat 时间: 2017-12-16 07:53

顶的就是你

作者: foxok 时间: 2017-12-24 14:17

表观遗传学

作者: dada 时间: 2017-12-31 11:26

彪悍的人生不需要解释。

作者: ladybird 时间: 2018-1-15 08:01

不知道说些什么

作者: sshang 时间: 2018-1-25 22:36

一个人最大的破产是绝望，最大的资产是希望。

作者: 咖啡功夫猫 时间: 2018-2-3 20:00

只有一条路不能选择——那就是放弃的路；只有一条路不能拒绝——那就是成长的路。

作者: 化药所 时间: 2018-2-4 16:53

我仅代表干细胞之家论坛前来支持，感谢楼主！

作者: Whole 时间: 2018-2-5 23:20

声明一下：本人看贴和回贴的规则，好贴必看，精华贴必回。

作者: 安安 时间: 2018-2-13 11:35

说的不错

作者: biodj 时间: 2018-4-12 23:48

来几句吧

作者: 8666sea 时间: 2018-4-13 16:44

干细胞研究还要面向临床

作者: 生物小菜鸟 时间: 2018-4-14 07:09

不看白不看，看也不白看

作者: beautylive 时间: 2018-5-3 12:27

真是汗啊我的家财好少啊加油

作者: 某某人 时间: 2018-5-11 11:01

不是吧

作者: dmof 时间: 2018-5-28 18:12

我想要`~

作者: 命运的宠儿 时间: 2018-6-3 19:25

先看看怎么样！

作者: 干细胞2014 时间: 2018-6-11 11:35

快毕业了希望有个好工作干细胞还是不错的方向

作者: 老农爱科学 时间: 2018-6-14 17:01

我的啦嘿嘿

作者: 多来咪 时间: 2018-6-22 17:56

@,@..是什么意思呀？

作者: dmof 时间: 2018-7-2 06:01

我等你哟!

作者: 蝶澈 时间: 2018-7-3 11:26

好帖子，要顶！

作者: aliyun 时间: 2018-7-3 14:43

这个站不错！！

作者: chongchong 时间: 2018-7-7 11:01

支持你就顶你

作者: 石头111 时间: 2018-8-2 14:10

干细胞疾病模型

作者: qibaobao 时间: 2018-8-29 21:33

我喜欢这个贴子

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