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标题: 小鼠ESC培养过程中如何鉴别细胞分化形态 [打印本页]

作者: dilal 时间: 2010-7-15 17:18 标题: 小鼠ESC培养过程中如何鉴别细胞分化形态

我是一个刚接触ESC培养的新人，对于小鼠ESC分化及未分化的细胞形态一直很朦胧，希望哪位高人指点一下如何区分。
另外传代后的细胞生长是否良好如何通过细胞形态来进行判断，漂浮细胞形态是什么样的，请指教，如果有图片更是万分感激了

作者: juan880929 时间: 2010-7-15 19:12

干细胞集落紧密，成三维状，细胞表面光滑、是圆形，如果细胞贴壁后后不圆了，那就说明分化了，形态好的图片文献中有很多，自己看一下就行了，传代后，漂浮的细胞都是死细胞，刚接种上的活着的干细胞应该周围比较光亮，细胞圆形，表面光滑，

作者: maozhuxiwo1 时间: 2010-7-15 19:43

借这个帖子问问，MEF密度高和低两种状态下，分别有多少个ES啊？ 1 p8 P2 ^. Z! N8 T. q) o6 n
最佳饲养层的时候，会有多少个克隆啊？
求教具体数字

作者: 恋水鱼 时间: 2010-7-15 20:22

细胞分化以后中央是密密麻麻的周围是正常的干细胞。如果是未分化的细胞整个都是匀质的。

作者: 周会 时间: 2010-7-15 21:40

细胞分化后就不是克隆性的生长了，而是形成单层，可以看见一个个的细胞，如果没分化正常情况下是看不见单个细胞的ESC的，刚接种的ESC悬液中，细胞体积较小，周围比较亮！

作者: dilal 时间: 2010-7-15 21:43

回复 2# juan880929 ; x: v' ^% v/ s$ J0 L
( V' p% p7 }$ i; P) F
w3 g2 F9 Y. w' E+ J
太感谢了，学习了，看来以后还得多留意留意

作者: dilal 时间: 2010-7-15 21:45

回复 4# 恋水鱼 4 e1 E0 y( H0 N6 I
8 c5 W+ p, D6 O0 {

谢谢，收获匪浅

作者: rhmm 时间: 2010-7-16 08:16

你养的是什么细胞，要是神经幹細胞的話應該是圓形透明的，聚集成球後應該就是一個個懸浮的細胞團塊，倒置顯微鏡下可見緊密排列的細胞，但要注意跟組織塊相區分

作者: 梦想lab 时间: 2010-7-31 19:25

我觉得还是AKP染色那个方法更好些，lz可以试试染色观察下，也就熟悉了未分化状态

作者: show0ji3 时间: 2010-8-1 09:53

基本看情况，你看那个团块是不是圆滑，不圆滑了就是周围分化了，要是集落中心有黑色的现象，那中间的细胞还是不要的好，机械传一下。分化的和不分化的很好区分。

作者: 深海鱼 时间: 2010-8-1 13:09

回复 10# show0ji3 : a9 R0 O! T5 N+ d. y

请问集落中间的黑色是为什么？

作者: show0ji3 时间: 2010-8-1 14:12

回复 11# 深海鱼 ! q9 O# n9 U7 X
/ u" P) g; X% J: S p4 D

这个我也不太清楚，有两种可能吧，一种是集落太厚了，一种细胞老化严重，我觉得是第二种，说实话我也不太懂为叙会黑，我养的就是有的有点黑，我看见黑就传代了，没再让它黑下去，哈哈

作者: 懵懂干细胞 时间: 2010-8-2 15:27

学到了知识！谢谢大家和楼主

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