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标题: 请教一下关于培养基中的碳酸氢钠 [打印本页]

作者: wqcyqy0811 时间: 2010-8-8 10:28 标题: 请教一下关于培养基中的碳酸氢钠

请问基础培养基中不含碳酸氢钠的培养基，培养细胞时用不用添加碳酸氢钠？
如果用的话，是用化学试剂的那种，还是有专门用于细胞培养的碳酸氢钠？
还有碳酸氢钠的作用是什么？谢谢

作者: 大海 时间: 2010-8-8 15:29

粉末培养基配制(以1 升为例)：细胞培养基通常须添加10 % 血清，因此粉末培养基之配制体积为900 ml，pH 为7.2 - 7.4。NaHCO3 为另外添加，若将NaHCO3 粉末直接加入液体培养基中会造成pH 之误差，或局部过碱。因此粉末培养基及NaHCO3 粉末应分别溶解后才混合，然后用CO2 气体调整pH，而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH)，因为氯离子对细胞生长可能有影响，且贮存时培养基的pH 易发生改变。NaHCO3的作用：培养基中使用了NaHCO3-CO2缓冲系统，并采用开放培养，使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶，再通过稳定调节温箱中CO2浓度（5％），与培养基中的NaHCO3处于平衡状态，从而调节培养基的PH值。

作者: xujie158 时间: 2010-8-8 19:37

请问基础培养基中不含碳酸氢钠的培养基，培养细胞时用不用添加碳酸氢钠？8 F: E, O5 ~' Z% {" A% e# Z& ^
如果用的话，是用化学试剂的那种，还是有专门用于细胞培养的碳酸氢钠？还有碳酸氢钠的作用是什么？; l8 W( b" Q2 H4 Z, w
简要回答这几个问题：1.需要添加，原因见三；
2.细胞培养要求条件较高，建议使用级别较高的NaHCO3，普通的化学试剂级的一般不太好，纯度上还是有些问题，我就见过黑色的杂质；. i& I, q. P* Q% j1 m9 p% Y
3.作用是起一个缓冲的作用，细胞培养过程中我们经常会看到其细胞培养基颜色发生改变，这就是其酸碱度变化的原因，NaHCO3是一种重要的缓冲剂，能够使其PH不致改变特快！

作者: wqcyqy0811 时间: 2010-8-9 08:39

请问大家使用的是哪种的碳酸氢钠呢？是什么哪个厂家的？因为我用的普通的化学试剂两次细胞都污染了，不知是不是碳酸氢钠的原因。

作者: 懵懂干细胞 时间: 2010-8-9 10:37

碳酸氢钠主要作用就是PH缓冲！

作者: huijinyu621 时间: 2010-8-18 13:47

我们用的也是化学试剂的得先配制然后高压灭菌在过滤一遍也没污染啊

作者: bunny19870512 时间: 2010-8-19 09:51

回复 6# huijinyu621 . @2 @6 S6 ~" E" B9 g! M3 n( ?9 e

你们的细胞培养基配好了灭一遍?????????里面的东西不会变质么?

作者: bin 时间: 2011-7-18 10:30

如果配制F12培养基，1L的该加多少碳酸氢钠可以达到pH7.0-7.2。

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