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标题: 前几天养了大鼠的MSC，有个问题向大家请教 [打印本页]

作者: 色色兔 时间: 2010-8-16 11:00 标题: 前几天养了大鼠的MSC，有个问题向大家请教

我用培养基冲骨髓后是全贴壁培养法，两天后全换液，当时因为杂细胞太多，但是可以看到有梭型的细胞贴了，又过了三天后，换液时发现细胞原来梭型的，变成扁平的了。请问，这细胞是不是MSC？还是刚开始看到的梭型细胞就是其他细胞，不是MSC？我自己现在认为是成纤维细胞，MSC就没有培养出来。请高人指点！

作者: exin11 时间: 2010-8-16 11:59

图片啊，没图片怎么给你分析。所谓有图有真相。。。

作者: illidancui 时间: 2010-8-17 13:30

个人认识是可能是梭形的MSC变成扁平的了) j6 o: ?/ k0 U/ ~; V
我的也经常这样，不知为何。

作者: aristolal23 时间: 2010-8-23 22:32

这几天正准备做，学习了

作者: dragon513 时间: 2010-8-25 08:40

个人认识是可能是梭形的MSC变成扁平的了
8 x4 p" z: G- b* ~我的也经常这样，不知为何。; ]9 \1 F$ X5 u, W2 u
illidancui 发表于 2010-8-17 13:30

* |! p/ X+ U$ i: h( F

同意illidancui的观点。

作者: decloud2009 时间: 2010-8-26 10:14

貌似分化了，是不是有好多角角啊，如果上图就更好了。

作者: viva 时间: 2010-9-22 11:14

我的也是这样，我也认为是分化了。为什么会很容易分化呢？

作者: qiongyacc 时间: 2010-9-23 10:50

好好学习一下

作者: qiongyacc 时间: 2010-9-23 11:01

最好照几张图片贴上来看看。
我自己也在做BMSC，谈一下我的一点经验：
1，全血培养我一般是两天后全换夜，但是上清液一般不会丢弃，放到另个培养皿里继续放2天，再全换夜时再丢弃，因为全血培养含RBC很多，影响BMCS的贴壁，这样做可以得多一皿BMCS细胞！' Q: A k- S8 ]
2，贴壁后的BMCS一般成集落样贴壁，一般不会成单细胞均匀散在贴壁，所以一般到第6或7天时用胰酶消化后吹匀继续在原皿中培养。
3，原代培养尤其是全血培养的BMSC杂细胞很多，形态不均，基本什么形态都有，但是随着传代，细胞会趋于纯化，多为多角形或梭形，实验用的一般都是第3-6代！' Z$ @ t- t0 @7 v- A
4,不知道说得对不对，请高手们指教，以便实验顺利进展！谢谢！

作者: helen841102 时间: 2010-9-27 15:08

谢谢

作者: hawkyiger 时间: 2010-9-29 09:32

非分化即老化，总之丧失增殖能力。介绍说原代培养中MSC细胞较杂，随着培养这种大的扁平状细胞逐渐被增殖能力强的小的梭形细胞代替，但实际上有时候大部分都为这种形态的细胞，那样就没什么养下去的必要了。MSC培养过程中密度较重要，如果密度较小很容易出现这种情况，不知是不是细胞间存在某种相互作用还是怎样。如果觉得细胞密度过小可以消化重铺至更小的皿中，同时加大一些生长因子的量，会有效果。不要在长不动的情况下只是换液，给它换个环境较好

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