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标题: 胚胎干细胞的分离培养 [打印本页]

作者: hhchen418 时间: 2010-8-24 14:41 标题: 胚胎干细胞的分离培养

请问谁做过小鼠胚胎干细胞的分离培养？
本人从延迟发育小鼠的桑葚胚开始培养，在进行原代克隆培养时，消化生长出来的细胞团块，结果发现用0.025%的胰酶无法将其消化成单个细胞？原因不知出现在哪？烦请有经验的通道指点一下！

作者: cony 时间: 2010-8-24 20:13

0.025%?胰酶浓度是不是太低了。。

作者: zpzp0312 时间: 2010-8-24 20:25

确实有些低啊！+ V" I# K* n2 f& e7 F- g( A5 w
建议用0.05的

作者: tangxiao 时间: 2010-8-24 20:28

印象中，好像是在显微镜下挑取吧，具体也没做过( [- j. n/ k3 {* R& M; v
给你个网址吧，里面有 http://www.jove.com/

作者: lfate 时间: 2010-8-24 21:33

加机械分离法

作者: hhchen418 时间: 2010-8-25 08:29

同意Ifate！我猜测可能还得加机械分离法。但对于小鼠ESC，我们用多大直径的转移针来分离好呢？我看到文献上用到了3种口径的转移针，但文献未提供具体口径，所以很茫然啊，希望前辈多多指教！

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