干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 急求神经干细胞诱导分化后死亡的原因 [打印本页]

作者: guojingjing 时间: 2010-8-28 21:13 标题: 急求神经干细胞诱导分化后死亡的原因

最近在做神经干细胞相关的实验，但是到分化这一部分就遇到瓶颈了。我的实验方法是使用P0小鼠的海马培养神经干细胞，培养基为DMEM/F12+B27+bFGF+EGF，细胞为悬浮培养的神经球。第三代细胞用于实验，分散为单细胞后种入PLL包被的24孔板，换分化培养基（DMEM/F12+B27+0.1%FBS），24h细胞伸出较长突起，48h后细胞突起更细，胞体变圆变小，96h后胞体基本呈碎片状，难以进行后续实验。
   两年前做大鼠SVZ干细胞的时候用的同样的方法，细胞就可以到第7天后分化为3种细胞，但是现在细胞不到4天就死了，欲哭无泪，因为找不到原因。
   尝试过将细胞首先用增殖培养基使其贴别生长24h后再换分化培养基，或者用10%的FBS，都没有用。
   恳请高手指教！急！！！！！

作者: junjunxu 时间: 2010-9-9 15:11

guojingjing ; 是否可以通过QQ交流神经干细胞培养心得，我也在培养：QQ652537630

作者: ouyangjuan 时间: 2010-9-9 18:02

你的培养基为什么要加B27啊？? 这些通常不是养已分化的神经类细胞才加入吗？

作者: jennyshy 时间: 2010-9-20 21:20

我做分化时也遇到这种问题，后来就直接在分化4d就做实验了。

不知道诱导3、4d换液结果如何，正在尝试

作者: guojingjing 时间: 2010-10-5 21:28

回复 4# jennyshy ' u# y& y0 _& o0 e; L0 c' a: L

7 k* X# e2 P" V& |6 e3 S) M
分化时间短的话有些细胞还不能发育成熟，比如神经元和少突胶质细胞

作者: superlamp 时间: 2010-10-7 19:15

试试N2分化培养基吧，我觉得效果挺不错的

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)