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标题: 急求神经干细胞诱导分化后死亡的原因！！！！！ [打印本页]

作者: guojingjing 时间: 2010-8-28 21:17 标题: 急求神经干细胞诱导分化后死亡的原因！！！！！

最近在做神经干细胞相关的实验，但是到分化这一部分就遇到瓶颈了。我的实验方法是使用P0小鼠的海马培养神经干细胞，培养基为DMEM/F12+B27+bFGF+EGF，细胞为悬浮培养的神经球。第三代细胞用于实验，分散为单细胞后种入PLL包被的24孔板，换分化培养基（DMEM/F12+B27+0.1%FBS），24h细胞伸出较长突起，48h后细胞突起更细，胞体变圆变小，96h后胞体基本呈碎片状，难以进行后续实验。
   两年前做大鼠SVZ干细胞的时候用的同样的方法，细胞就可以到第7天后分化为3种细胞，但是现在细胞不到4天就死了，欲哭无泪，因为找不到原因。- c$ Y& |  Q5 X. G
   尝试过将细胞首先用增殖培养基使其贴别生长24h后再换分化培养基，或者用10%的FBS，都没有用。$ B1 K$ l! z' ~8 ~& ]: K6 L
   恳请高手指教！急！！！！！

作者: nculsa747 时间: 2010-11-21 16:11

我给出一个可能的原因：用24孔做分化时，吸/加包被液或培液时，操作应快，或者吸一个，加一个。不然就干掉了。我在做HESC分化，可以探讨一下，呵，QQ 562371333

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