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标题: 做iPS半年多，一直没有结果，有没有高人能全程指导一下 [打印本页]

作者: reinincite 时间: 2010-8-28 21:54 标题: 做iPS半年多，一直没有结果，有没有高人能全程指导一下

做iPS半年多，一直没有结果，有没有高人能全程指导一下/ q, S ?2 _5 T) m
做了半年多，眼看着博士接近毕业，一直没有把这个搞成，惭愧，有没有高人能伸手相救，感激不尽。

作者: 上官鑫 时间: 2010-8-29 12:01

和我一样

作者: 懵懂干细胞 时间: 2010-8-29 12:08

也没做过！只能祝你好运！

作者: exin11 时间: 2010-8-29 13:06

我想问你是什么法做的？有简单的，也有繁琐一些的。你想怎么做？+ u$ d/ U7 {9 v
你也没说清，我可没辙！4 C+ A. ~3 F: b# L
这有一篇cell上的protocol，你看看吧; g% w. F" g9 w# r
[attach]13099[/attach]/ r1 x* W$ h2 x) I1 \
good luck！

作者: reinincite 时间: 2010-8-29 13:29

谢谢。这个不错。里面讨论胚胎干细胞较多。

作者: reinincite 时间: 2010-8-29 13:30

回复 2# 上官鑫 . n' }+ M3 f% o6 }! x4 ^- A" z; J

~. ^- e3 @7 S3 \
呵呵。彼此。总是有这样那样的问题，而且每次试验时间周期都是很长

作者: 瑟瑟狼 时间: 2010-8-29 16:38

多读文献吧。。。:lol3 f' b* z3 B6 @' l1 D$ e
已做成功的飘过。。。

作者: 大刀无敌 时间: 2010-8-29 20:35

首先要确保你的质粒没有问题，然后是你的病毒没有问题，然后就是诱导密度，这几点没有问题应该差不多了

作者: 上官鑫 时间: 2010-8-30 06:11

人是不是比鼠的难做？还有就是人的你们一般是怎么诱导的？

作者: yuanzhiguo 时间: 2010-8-30 10:45

同病相怜！俺也是这样的倒霉蛋！哈哈哈！共同努力吧！

作者: tanguixiang 时间: 2010-8-31 15:31

我做的鼠的，感觉还挺容易，今年51节的时候要来的LV质粒，后面碱裂解大提质粒，钙转质粒制备LV病毒，用的都是很原始的方法（实验室没钱买试剂盒），现在已经制备出来了，挑了几个克隆，传代和鼠干细胞性质一样，免疫染色已经做了OCT,NANOG 等几个因子的检测，没有什么问题~~~很多实验室用fugene HD 转质粒提高制备病毒的滴度，老板没钱我后来用钙转，发现转染手法好，293T细胞也可以达到90%以上的转染率（我跑流式测了转染效率）。。。群里的高手交流~~~

作者: daviehe 时间: 2010-8-31 19:14

大家多交流啊用的什么方案、试剂

作者: aceman 时间: 2010-10-12 09:18

learning

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