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标题: 请教拟胚体如何传代？ [打印本页]

作者: zhaoyan1983 时间: 2010-9-18 23:01 标题: 请教拟胚体如何传代？

请教拟胚体如何传代？ u! Q( C. w2 T$ U" R3 p- ]( U
1.请问拟胚体有没有必要进行传代？什么情况下需要传代？
2.传代时是将所有的悬滴先混在一起之后再进行传代还是将悬滴某一拟胚体分离出来单独进行传代？. j$ N9 b, H# P5 C; S
3.如果需要分离出来的话应该如何操作？具体步骤，谢谢！
4.另外请教悬滴和悬浮培养有什么差别？除了悬滴和悬浮之外还有别的培养拟胚体的方法吗？哪一种效果更好一些？& ~! O1 w( r; n9 o
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请指教！

作者: fespysok 时间: 2010-9-20 11:15

4.另外请教悬滴和悬浮培养有什么差别？除了悬滴和悬浮之外还有别的培养拟胚体的方法吗？哪一种效果更好一些？
悬滴法易控制拟胚体的大小、形态；悬浮法能简便的得到大量的拟胚体，但可能大小不一。没有听说还有其他方法来培养拟胚体。个人认为悬滴法更好一些！

作者: supergama 时间: 2010-9-20 12:57

首先拟胚体是体外模拟胚层发育的模型，细胞成EB后EB会长大过程是早期EB，中期EB到晚期EB中间会出现空腔并伴随EB贴壁，所以7 b& H; G2 F# g& x, ?) C G5 m
1、EB不传代，一般换换液就好。贴壁以后的EB按一般细胞的传代方法传代。! _! b6 \! D) J6 |3 N! ` b0 P5 X
2、悬浮法可以大量得到EB，但大小不一，实验不好控制，可以在显微镜下挑选形态较好的EB用枪转移到新的细菌培养皿中。悬滴法得到的EB形态很好、很均一但要得到较多的EB时工作量比较大。
3、有文献用EP管悬浮法培养EB，EB可以养得很大，形态较好，具体选用何种方法应根据自己的实验来定，如果实验时间紧且需要的EB材料量大一般悬浮法，如果要拍照和形态观察悬滴法一般是标准操作。

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