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标题: 病毒包装质粒的比例 [打印本页]

作者: 上官鑫 时间: 2010-9-24 01:03 标题: 病毒包装质粒的比例

请教pMXS-DNA,pUMVC,pCMV-VSVG用293T细胞包装时的这三个质粒的比例。谢谢

作者: daviddow 时间: 2010-9-24 19:15

20ug:15ug:6ug in a 10ml dish

作者: 164ly 时间: 2010-9-24 19:50

不知道你要包装的是什么病毒。$ z' C+ V) O2 f- x, p
但不管是哪种，各种质粒的比例都会影响到病毒的包装，公司一般都是把这几种质粒做成mix形式，不告诉客户的

作者: 上官鑫 时间: 2010-9-25 02:53

回复 3# 164ly

+ h+ P% C8 t! s3 s2 L
Retrovirus

作者: 上官鑫 时间: 2010-9-25 09:05

Hi daviddow,
20ug:15ug:6ug in a 10ml dish! j2 R: D1 V9 X8 D
DNA量会不会太多了啊？不是10cm dish最多转20ug DNA吗？这样加起来都41ug了。

作者: exin11 时间: 2010-9-25 10:54

我们用的是10：7.5：5

作者: 上官鑫 时间: 2010-9-27 00:28

我在想pUMVC是low copy的，提质粒的时候，在DH5a都表达很低，会不会在293T细胞中表达也低，所以这个质粒DNA要不要多加点。

作者: 上官鑫 时间: 2010-9-27 00:44

怎么突然没有发短消息的权限了。

作者: wuxiao101325 时间: 2010-9-27 09:54

回复 1# 上官鑫 / X$ Q/ q$ s3 i E! `8 U
请问楼主你们实验室做iPS的addgene公司的质粒怎么购买的？

作者: 上官鑫 时间: 2010-9-27 11:02

直接在公司购买啊，我们实验室有专门订东西的，订单交给她就可以了，那个好像要shift费。

作者: stemcell8 时间: 2010-9-27 20:19

楼主的质粒在那个公司购买的啊？

作者: 上官鑫 时间: 2010-9-28 01:11

addgene

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