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标题: 求助：大家帮忙看看贴壁细胞上面层是什么细胞啊？ [打印本页]

作者: stefan 时间: 2010-9-24 12:21 标题: 求助：大家帮忙看看贴壁细胞上面层是什么细胞啊？

本帖最后由细胞海洋于 2010-9-24 18:34 编辑   n$ s, ^7 e) |8 U' Q4 n5 R' H( c$ K

现在养狗的间充质干细胞已经近2个月了，进展不是很大，感觉很郁闷啊，养不成功后续的实验就没法进行啊。前一段时间连典型的间充质干细胞的形态都没看见。还好，昨天换液后终于看见一些像间充质干细胞形态的细胞，总算点希望了啊！！
   现在让我困惑的是，贴壁细胞上面老是有一层细胞，长的特别快，今天换液后，明天就能看见密密麻麻的细胞悬浮在培养液上，形态是圆形的，以前以为就是间充质细胞，但是现在看来并不是，记得有前辈说可能是造血干细胞，我也不知道到底是什么细胞，我想问的：如果是造血干细胞，经过这么多次的换液不能将它去除掉吗？如果不能去掉，它会影响间充质细胞的生长吗？还有就是有时能在瓶壁看见各种形态的东西，长的像花一样，不知道到底是什么东西，，或者还是细胞所组成的一些大体形态啊，真是比较困惑？？请高手指点指点，这里先谢过了！！下面是图片：
这幅图是：贴壁细胞上面的一层细胞，长势很快，细胞呈圆形！！
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第二幅图：细胞有点长梭形，感觉是间充质细胞形态，不知道是不是我要的细胞，还的观察;
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下面三幅图：观察细胞时看见的培养瓶壁的各种形态，不知道是什么东东，有的和细胞边缘相接！！
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作者: mhy1982 时间: 2010-9-24 18:42

图片不清楚啊！看上去不像间充质干细胞！如果是红细胞经过冲几次就没多少了，如果是细菌就会繁殖的很快，建议继续密切观察！

作者: 玉扇官巾 时间: 2010-9-24 21:15

前面两幅确实不清楚，至少高倍镜嘛，找好一点的相机拍，后面三幅好像是界面根本就不是细胞界面啊，聚焦是不是在细胞层面之外的层面？

作者: maquanhui.0509 时间: 2010-9-24 21:25

第四和第五张图是结晶

作者: chuanbaozang 时间: 2010-9-25 08:50

我觉得后几张是瓶子上的，与细胞无关

作者: Iris 时间: 2010-9-25 09:23

是显微镜对焦的问题

作者: qiongyacc 时间: 2010-9-25 10:07

红细胞一般在常规培养条件下不会增值，换液的时候用pbs洗3遍，我觉得你的pbs最好加点双抗洗洗，不能排除污染的可能！

作者: stefan 时间: 2010-9-25 23:08

谢谢大家的指点，不知道 maquanhui.0509战友指的结晶是什么，能否具体指点指点啊？
关于“玉扇官巾”战友所说的是不是在细胞层，我觉得应该是在细胞层，因为这些形态的边缘可以见到细胞，还有就是，有些形态图形之中就有细胞的存在！关于加双抗，我的培养基里本来就加有双抗，难道PBS里也要加双抗，请指教？

作者: fespysok 时间: 2010-9-27 09:18

我在观察细胞的时候，也会看到“结晶”类的图形，我个人觉得是培养皿上的东西，好像没有影响细胞生长，感觉有一张图片是冷凝在培养皿表面的水！

作者: 卡门 时间: 2010-9-27 10:55

我也觉得好像不是MSC

作者: susuloveq 时间: 2010-9-28 16:34

污染了吧

作者: hawkyiger 时间: 2010-9-29 09:14

1. 这不是间充质干细胞。一般来说，没有死亡的话，间充质干细胞经过几个小时就会贴壁。按你的描述，悬浮且增殖迅速，也不会是造血干细胞或血系细胞（造血干细胞一般条件下体外无法大量扩增，血系细胞就更不用说增殖了）。这更像是污染，观察一下你的培养液是否浑浊。如果你一开始原代贴壁细胞很少的话就很难扩增起来了，重新分离吧。
2. 那些结晶状物质是培养瓶上的，无须理会

作者: stefan 时间: 2010-9-29 18:14

谢谢大家的指点，经过几天的观察，可能是污染了。MSC长不起来，培养液也变浑浊，只看见一瓶里面有点像MSC的细胞，看来只能重做了啊！白费了一个月的时间啊，老板还催得紧，真是郁闷啊！再次谢谢大家的指点！

作者: liweitiky 时间: 2010-9-30 18:31

回复 5# chuanbaozang 5 f- V' V, E7 Z
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4 ]3 ~6 \$ ]# j2 h; F2 _' V
我也觉得后面三张跟培养瓶有关，前面的图片和我养的小鼠BMSCs很像，圆圆的，也没有搞懂是什么东西？期待高手解决

作者: lydia033rj 时间: 2010-10-2 23:19

后面几张是瓶子上的脏东西，用酒精棉把瓶子擦一擦就看不见了

作者: 马锡慧 时间: 2010-10-6 21:56

擦一下培养瓶再照，我感觉是瓶子上的东西

作者: sara 时间: 2010-10-6 23:15

如果是瓶子或镜子上的脏东西的话，调一调显微镜就看不到了。

作者: putongyingwu 时间: 2010-10-9 11:30

明明对着的是培养瓶界面嘛。没对到细胞层

作者: 267318024 时间: 2010-10-11 13:59

楼主显微镜没有调整好，图片不是干细胞！

作者: cijiaer 时间: 2010-10-19 22:15

楼主显微镜没调好，看的是培养瓶，不明物体是培养瓶上的脏东西，不好意思的说，我也干过这事，

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