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标题: 小鼠胚胎干细胞感觉很小是怎么回事啊，谢谢 [打印本页]

作者: xiaoserizi 时间: 2010-9-26 11:23 标题: 小鼠胚胎干细胞感觉很小是怎么回事啊，谢谢

最近从别的实验室借来了胚胎干细胞系，种在了自己做的feeder上，感觉形成的集落很小，培养了一段时间了都是这样，想做鉴定，但是定的akp没有到，问问各位战友，这是不是说干细胞分化了，还是状态不好，我是用海克隆的血清，需不需要用gibco的啊/ Q z; x7 D" A5 J1 B
，现在应该怎么办啊，因为我看到别人样es时，集落都很大，而且很多，两天就可以1：3传了，但是我的长的小也很忙，迷茫啊

作者: 细胞海洋 时间: 2010-9-26 11:56

建议你上图

作者: liweitiky 时间: 2010-9-26 12:07

回复 1# xiaoserizi 上图看看，
俺的也是小鼠骨髓的，也很小。

作者: qiuweiqin0618 时间: 2010-9-26 12:07

应该是状态太差了，有可能是别人传了几代的

作者: juan880929 时间: 2010-9-26 17:37

我们血清都用Gibco的，你可以试一下。但是集落长不大应该是细胞状态不好，可以用20%的KOSR培养基试一下，有可能会逆转这种状态。但是低代次的细胞有可能会长得慢，你可以让他多长几天试一试。而且建议你从那要来的就问一下他们那的培养体系，换培养体系的话对细胞也会有影响

作者: cony 时间: 2010-9-26 20:55

我也觉得是培养液的问题，因为ES是从别人那拿的，拿回来后按照自己的培养液养，可能ES有点不太适应，建议你问下之前用的是什么培养液。海克隆的我用来养ES也不错，应该不是血清问题

作者: dilal 时间: 2010-9-26 21:16

我们养的也是小鼠ESC，细胞集落小可能的原因有：
1、培养基血清浓度过低，你可以尝试增加血清浓度看看效果如何；4 w0 y% o/ d. ?1 B5 z
2、培养基问题:可能选用的培养基不大适合小鼠ESC，我们采用的培养基是高糖DMEM+10%胎牛血清（gibco）+巯基乙醇+1%非必需氨基酸，你可以借鉴一下。
不大像是细胞分化了，细胞分化并不影响其集落大小，集落常常呈现出分叉状，而且细胞核折光性较差。如果分化了，建议检查一下LIF的抑制分化效果。

作者: xiaodiao123 时间: 2010-11-3 11:12

为什么我培养胚胎干细胞不用血清呢，大家用血清的目的是干什么啊，贴壁培养吗

作者: lhw7514093 时间: 2010-11-21 10:51

楼上同志，培养动物细胞不用血清行吗？

作者: lhw7514093 时间: 2010-11-21 10:52

你没用血清也得用血清替代物吧，要不怎么行啊？

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