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标题: 请大家指教这个细胞养的如何？是细胞死亡还是污染、分化？？（附图） [打印本页]

作者: yxh295 时间: 2010-9-29 20:12 标题: 请大家指教这个细胞养的如何？是细胞死亡还是污染、分化？？（附图）

本帖最后由细胞海洋于 2010-9-29 21:02 编辑 2 F6 u( Z( ]% i

我是新手，初次养人胚胎干细胞，请大家指教这个细胞养的如何？是细胞死亡还是污染、分化？？

作者: supergama 时间: 2010-9-29 21:24

很像以前碰到过的一种污染，但并不确定。另外细胞已经汇合了，应该早些传代了。

作者: shewawa 时间: 2010-9-29 23:09

我个人觉得这个细胞很不错啊。界限清楚，内部细胞团块界限不清晰，这些看起来都是优良的表现。但是和旁边的细胞距离近，估计细胞密度很高吧。应该早点进行Passage。这个可以把形态好的细胞进行挑选passage，不过你要还有很多细胞就扔了吧。

作者: zhaoyan1983 时间: 2010-9-29 23:20

回复 3# shewawa + Q) R( s- i# E d/ J% p

$ F0 x$ g( `5 P& k8 O9 Y$ `" d
请教一下像这种图片是挑单克隆传代比较好？还是按普通的传代比较好

作者: decloud2009 时间: 2010-9-30 05:07

坐下慢慢看.大家继续讨论.

作者: have-a-rest 时间: 2010-9-30 08:58

没有污染。
细胞密度有点高了，我指干细胞。: \+ z' g6 T5 z5 y7 B( q% I$ D7 @
分化迹象突出，建议选择较好的克隆手工传代，逐渐会好的，密度要调低一些。
密度的原则是两个克隆传代前不要长到融合。

作者: qiongyacc 时间: 2010-9-30 17:08

我觉得细胞状态还可以，应该早些传代，而且靠上的那个集落的右上角部分已经开始分化了，传代时剔除这部分效果会更好！
祝好！

作者: shewawa 时间: 2010-9-30 18:18

回复 4# zhaoyan1983 + q0 n# H! u" L I3 C8 h
5 z% \- p/ y( u
我只看到了一个细胞啊，我觉得要是很多细胞都是形态比较好，没分化的状态是可以这样传代的，看是要是少数细胞状态比较好就应该单克隆挑选了。

作者: cony 时间: 2010-9-30 23:00

边缘尚还清晰，折光性还可以，致密性高，但是克隆团表面不够光滑，貌似要分化的样子，尽早传代。。

作者: henryjia 时间: 2010-10-13 06:20

有几点楼主没有明确：
1。是否有饲养层细胞 - 看上去是有的，细长类纤维细胞( W2 t% l2 O, r6 L' h6 h2 P- @
2。使用的什么染色？
" v3 y3 \' }4 X* J
从形态观察可以发现：' W" [% ~0 j/ [7 f
1。饲养层细胞老化严重，2种可能，要么饲养层细胞本身不健康；要么INACTIVATED(灭活)后培养时间太长了。
2。一共可以看到4个HES克隆，但是11点到5点钟的3个克隆已经界限不清，出现融合。2 d1 o1 d$ N, t

3。还是11点到5点钟的3个克隆，很奇怪出现了类似融合或者停止生长的现象，据我的经验，往往密度太高或距离太近时，会出现细胞堆积，出现分化。这一点我有点不明白。

综上所述，必须马上制备新鲜饲养层细胞，立即手工传代。( _+ j! ]) }& T- b- F" E
" _6 _; |% ]7 }8 g! {* T, W: N
希望对你有帮助。

作者: xiaodiao123 时间: 2010-11-3 11:03

底部的细胞是饲养层吗，为什么觉得细胞种类不止一种，而且贴壁样细胞较多，是成纤维细胞吧。不过的确是该传代了

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