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标题: 为什么小鼠骨髓间充质成骨诱导后有很多细胞死掉了？？ [打印本页]

作者: sara 时间: 2010-10-13 16:03 标题: 为什么小鼠骨髓间充质成骨诱导后有很多细胞死掉了？？

如题，本人正在做小鼠骨髓间充质成骨诱导，加了成骨诱导培养基之后有一些细胞像是脱壁掉下来了，半浮着，是死了吗？这正常吗？用的培养基是我们实验室已经用过很多次的，只要是成骨诱导我们都是怎么做的，应该没有问题。我在想是不是我的细胞密度小了点啊，因为对照的长得挺满的细胞就没咋地。本人新手，望高人指点。
谢谢大家！

作者: luoziwei 时间: 2010-10-13 20:22

你确定药品有没有过期？

作者: sara 时间: 2010-10-13 21:27

不确定，但是应该没过期吧，之前一直用的。

作者: luoziwei 时间: 2010-10-14 08:48

同一批实验，同样的medium，对照组没问题，我想就是实验组的药品或者配方有问题了，一般来说细胞密度（针对同时消化种下的细胞）对成骨分化影响不大，你再仔细重复做一遍看看。

作者: ivantanqi 时间: 2010-10-14 15:31

这个很正常，新手经常会碰到，/ f& c2 `6 k6 f0 D' q, o0 G0 U, e' H
首先最大的原因可能是你操作换液时，碰到了细胞，破坏了细胞贴壁。
还有个原因是你的细胞本身老化比较厉害。

作者: gxbzj吉祥草 时间: 2010-10-22 13:30

密度也有影响，我听老师说的，因为细胞间的传导信号变弱，应该适当密些~~

作者: 色色兔 时间: 2010-10-25 15:39

我的细胞诱导了不减少啊，反而还持续增长啊

作者: lvmaoshiwo 时间: 2012-2-21 16:10

回复 luoziwei 的帖子+ J2 E' V! H" `! Y

对照组还跟诱导的时间一样培养吗？用的什么培养基，要不要传代，不要传代的话细胞增值过了就会死掉吧？

作者: luoziwei 时间: 2012-2-22 09:21

回复 lvmaoshiwo 的帖子# |% F! L( E1 r% X& j
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平行实验当然要相同的培养条件了。DMEM低糖，无需传代，把握好细胞密度，不要太密了

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