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标题: 新人求助：读文献时关于coIP和biotin-tag的疑惑 [打印本页]

作者: zhongshanlh 时间: 2010-10-13 21:58 标题: 新人求助：读文献时关于coIP和biotin-tag的疑惑

[attach]15154[/attach]读文献时遇到的问题，自己想不明白，请教大家。

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我们知道为了鉴定在细胞中和已知的某种蛋白相互作用的其他蛋白，coIP后拿去做质谱是非常常用有效的一种手段。
读文献时，这里我有一个疑问：
为了鉴定和PRC2（Polycomb repressive complex2）作用的蛋白，作用实施了coIP以及tandem coIP，coIP中用链霉亲和素纯化，tandem coIP中用FLAG-tag和biotin-tag双标记，然后先用anti-flag纯化，再将此洗脱成分用链霉亲和素纯化。
这里的第一个疑问是为什么要同时进行两个实验（即coIP和tandem coIP，有区别和意义吗）？+ H. ]" t# J; a1 m1 b1 `/ V4 f9 p
第二个疑问是作者使用biotin-tag时为什么要在细胞中同时表达bacterial biotin ligase (BirA)，即BirA的作用是什么？* g$ O+ |( |4 y8 C3 J2 U
可能我描述的不够详细，附原文，请各位赐教，小弟为新人

作者: xzt41 时间: 2012-8-25 17:35

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同样有这样的困惑。。。

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