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标题: 请问支原体污染和黑胶虫污染有什么区别？ [打印本页]
作者: shuishanglingzi    时间: 2010-10-14 13:25     标题: 请问支原体污染和黑胶虫污染有什么区别？

我现在培养的细胞发现了一些黑点点，400倍下观察会做布朗运动，像支原体，又像人家说的黑胶虫~该怎么办？
作者: supergama    时间: 2010-10-14 14:17

如果是布朗运动的话，黑点也可能是细胞碎片的。支原体通常会粘附在细胞上，用PCR检测一下就知道。而黑胶虫，那是一个传说...建议可以用PBS洗涤，然后观察黑点的出现特点，如果呈爆发式生长那么尝试抗生素处理或弃之。
作者: cony    时间: 2010-10-14 20:18

这东西很难消除，酒精杀不死，双抗没作用，如果对你的细胞影响不大的话，PBS多洗洗就行了。如果严重影响细胞增殖，那要找找是不是血清带进来的。
作者: 细胞海洋    时间: 2010-10-14 20:41

建议上图
作者: shuishanglingzi    时间: 2010-10-15 12:57

回复 2# supergama
& c) o0 J# `7 o' d! f+ `
5 K% {- x/ y' g) o1 b% l: f, z1 T2 e
  我的细胞是悬浮培养的，所以PBS液洗这方法用不上。它长的不多，是游离在培养液中，没有贴附在细胞上，样子很像支原体，拿到医院检测确是阴性。
作者: shuishanglingzi    时间: 2010-10-15 12:58

回复 3# cony # Z- n. h5 k1 o
7 i) Z% h2 B; C4 e$ D4 l
8 q, Z$ S3 `4 o3 t
    我没有用过血清的，而且操作也一直很小心，现在找不出来源。
作者: supergama    时间: 2010-10-15 16:27

回复 5# shuishanglingzi
: _& v, K7 Z8 u4 @你可以用hotchest染个核看看。
作者: 267318024    时间: 2010-10-15 18:43

这个问题我师兄遇到过，还有我同学的细胞全部是黑胶虫感染，据说数量还不少，结果是全部污染了，细胞也扔掉了，师兄的用的是培养基冲洗的，效果也不行，在网上找了一下，没有太好的方法，但是好像有一点，数量少的时候不影响细胞的生长，如果细胞长的多，它们就相对会减少，师兄的考虑可能是真菌之类的！
作者: shuishanglingzi    时间: 2010-10-20 12:19

回复 8# 267318024
# c0 H& ]- N- }5 h1 y
8 s6 X! s: r, S$ G2 u" s# J3 B: N' `6 b
    他怎么确定一定是黑胶虫污染呢？
作者: shuishanglingzi    时间: 2010-10-20 12:23

回复 7# supergama
# d! D6 C1 J# L9 Z+ {. X0 t! j- T* l" D! Z
: t& ^$ U7 T; Z9 @; X4 i+ C
    上次染了，结果sigma的hotchest 33258本身成假阳性。
作者: 267318024    时间: 2010-10-20 18:17

回复 9# shuishanglingzi % I3 v$ \: L3 a' \
- k/ L3 y' n( v' ?" A

5 m. m3 @+ O$ Y/ n    这个还真没有鉴定过，就是看见细胞与细胞之间有黑点在游动，用了抗生素后也没有明显的效果，细胞之间密度大点的时候黑点就少了，上网查了一下，考虑为为黑胶虫，所以不敢肯定。
作者: djj01    时间: 2010-10-20 20:41

建议再取样到医院反复检查，排除人为或其他客观原因产生的影响，不排除不是支原体！
作者: hawkyiger    时间: 2010-10-21 09:47

黑胶虫确是尚无定论的东西。。。不过听一个老师说0.22um滤器过滤两遍可以除掉99%以上的支原体和黑胶虫，因此我加培养基时一般滤两遍。。。
作者: shuishanglingzi    时间: 2010-10-22 08:16

回复 12# djj01
- \  v* w. a0 g, `! l0 A" P
( K% a( H1 W! o6 N+ D8 K! M( `- P2 X4 ]! ~# h4 x$ G/ O9 z
    已经拿到医院检测两次了，都为支原体阴性。医院的检测主要针对四种常见的支原体，所以结果不一定正确。
作者: shuishanglingzi    时间: 2010-10-22 08:20

回复 13# hawkyiger 5 \4 x1 L& x; i; B+ t# `

. P" Y7 l6 I. m5 K
! |: v! W% `! ~: f( J; _+ T    过滤两次是挺好的，但是对于细胞长期培养的话还是一种隐患。最好能找到一种有100%把握的方法。
作者: xiaoma402716390    时间: 2010-10-25 17:24

本人感觉可能是黑胶虫，我们实验室也经常有同学的细胞被黑胶中污染，好像影响不大多洗几遍就行了。
作者: mednano    时间: 2011-5-25 21:00

shuishanglingzi 发表于 2010-10-14 13:25
! \* G' m& p, u2 k我现在培养的细胞发现了一些黑点点，400倍下观察会做布朗运动，像支原体，又像人家说的黑胶虫~该怎么办？
" f8 \* t& d1 \# c5 G
我的细胞也 出现了，开始拿回细胞时没发现，传了一次后一下子出现很多，用PBS洗了很多次减 少了但还是有，好不容易要来的细胞，请问楼主后来怎么处理了？急求帮忙。
作者: 细胞海洋    时间: 2011-5-25 21:43

回复 mednano 的帖子$ j7 B1 _, p9 R

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