干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: EB后消化吹打成单细胞有什么技巧？ [打印本页]

作者: erikoapril 时间: 2010-10-14 21:20 标题: EB后消化吹打成单细胞有什么技巧？

感觉种EB后的mESC非常容易成团，很难消化吹打成单个细胞，, H. Y8 i* U/ q7 J, M u
请问各位高手们有没有什么好的方法经验？: f# f" J. e* F6 L
比如用胰酶消化的时间和吹打的次数、力度？

作者: juan880929 时间: 2010-10-15 08:25

为什么要吹打成单细胞呢，分化基因的检测一般是整个做切片啊

作者: fish_zbw1985 时间: 2010-10-15 15:57

回复 2# juan880929
做流式检测应该需要消化的，发现用胰蛋白酶消化很容易将细胞消成絮状物

作者: wjmkg 时间: 2010-10-16 19:10

回复 1# erikoapril ) n& x" j+ z& k% D/ J( X' U+ r

可试试先用胰酶消化一下，弃去胰酶，再加胰酶消化后用血清终止反应后吹打一百次左右

作者: wjmkg 时间: 2010-10-16 19:12

回复 3# fish_zbw1985 U2 a, Q* V6 k" J" d

你消化的时间有点长了

作者: fish_zbw1985 时间: 2010-10-16 22:24

我用0.05%胰蛋白酶消化5min，然后终止吹打，大团块有时候就容易消不均匀

作者: erikoapril 时间: 2010-10-18 21:38

以上的方法都试过了，效果依然不是很好。。。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)