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标题: 大家帮忙看看MEF细胞如何 [打印本页]

作者: huanmiao2005 时间: 2010-10-25 12:53 标题: 大家帮忙看看MEF细胞如何

MEF原代培养,这是第三天，大家帮忙看看细胞有没有吗？能传代吗？

作者: yuangaoqian 时间: 2010-10-25 15:25

你问的是什么意思？细胞都铺满了，可以传代了，不过做饲养层，传代次数最好控制在5代以内，否则不利于支持胚胎干细胞生长。

作者: 是鸟就要去飞 时间: 2010-10-25 16:36

请问楼主你的feeder cells 接种到多大培养皿，接种的数量是多少啊

作者: huanmiao2005 时间: 2010-10-25 17:22

谢谢yuangaoqian 6 b0 B, x/ i: m
我是想问下有没有杂细胞那些小圆圈是什么 - P0 }! i E, {2 T
我刚开始接触这块呵呵很多不懂的望多多指教4 I7 r0 `3 M8 y Z+ c
至楼上
我是一个冻存管复苏到一个25瓶的

作者: deron 时间: 2010-10-25 17:58

回复 4# huanmiao2005
4 G1 w5 P6 _% T# ?& w

死细胞，培养中经常会遇到的。有时候是因为生长环境太挤了，有时候是因为自然凋亡等等，于实验无大碍。

作者: deron 时间: 2010-10-25 17:59

话说还没见过MEF，坛子里的大虾们指导下呗

作者: huanmiao2005 时间: 2010-10-25 18:32

那我传代以多大密度比较合适还盼指点

作者: daviddow 时间: 2010-10-25 18:51

是不是分化了？

作者: luoziwei 时间: 2010-10-25 22:01

回复 1# huanmiao2005
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请问版主，图片中小小的亮点是什么呀？我对这个好奇

作者: wky98 时间: 2010-10-26 08:44

亮点应该是凋亡物质吧

作者: w1986725 时间: 2010-10-26 10:22

太密了,不知你的细胞长了几天长成这样?一般需要按1:6传代,还要控制传代次数,进行丝C处理

作者: mubaiyan 时间: 2010-10-26 16:51

回复 9# luoziwei 5 \- t6 P) P1 t6 \$ _- q

是死细胞。

作者: cony 时间: 2010-10-26 18:38

可以传代了，以1：2-3传代为易，本人觉得细胞密点对其状态有联系。图中亮点应为飘浮的死细胞

作者: 张也行 时间: 2010-10-27 00:49

原代的话确实长的很快，即时换液和传代。死细胞很正常啊，换液的时候洗掉就好了。8 T/ m: e8 N0 r9 U3 D, y/ ?3 _
你养的挺好的。个人感觉只要把四肢和脏器去掉的话很少有杂细胞的，再说MEF长的快，贴壁也快杂细胞也很难竞争的。

作者: sun_happone 时间: 2010-11-6 10:28

小圆点应该是死细胞,按我们实验室的经验,培养到中皿的话是10的5次方个mef细胞,你可以试试,做滋养层之前先要用丝裂霉素处理.

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