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标题: 关于细胞培养的一个问题 [打印本页]

作者: sara 时间: 2010-11-3 23:52 标题: 关于细胞培养的一个问题

有没有什么方法，又不过多的浪费培养基，又不会让细胞老化太快，也不常常传代弄得细胞很老吗？4 e& d/ A. F1 T+ B6 h0 |8 j Y" V6 u
我知道鱼与熊掌不可兼得，但是这种想法有可能实现吗？
谢谢大家！请前辈指点！

作者: cc1986 时间: 2010-11-4 09:09

建议在大瓶里面培养，接种密度不要太高，这样一代的时间更长，收货的细胞也多。! i4 L$ L/ `7 I+ O2 F1 [* p: q2 Z
下面是个密度推荐表（仅供参考）。有文献报道，低密度接种（100cell/cm2），间充干细胞更不容易分化，还有就是80%融合前一定要消化传代，长满了消化细胞液容易老化。
[attach]16212[/attach]

作者: chuanbaozang 时间: 2010-11-4 10:16

适当降低培养基中血清浓度，添加一些因子以及还原性的物质，如抗坏血酸等

作者: 清影 时间: 2010-11-4 11:02

12-Well,细胞接种密度会不会太高了，我们都是接种10000cell/well.

作者: 飞翔的十字架 时间: 2010-11-4 14:25

回复 2# cc1986
8 i& V6 }% y+ x6 j$ n3 ^& Z. ~
" B* A P1 \! r C$ L8 d- f
对这个图不是很清楚，能不能解释下
如果用全骨髓贴壁，原代接种密度怎么算

作者: bridgeyangfan 时间: 2010-11-4 17:14

给你个网站，貌似很好：http://www.51protocol.com/cell/base/20061109/2557.html

作者: cc1986 时间: 2010-11-5 00:32

回复 5# 飞翔的十字架
: H* V8 F' | w. j, Z7 X& ]8 q
是我没说清楚，这是密度梯度离心方法的推荐密度~~目前也是刚开始用这个方法养。, J, z: a# y9 p
全骨髓我还没做过，个人对这个方法不怎么看好。分离液也不是很贵吧。

作者: 飞翔的十字架 时间: 2010-11-5 02:02

回复 7# cc1986 + t' o# ?, |+ \- e3 Z* f

请问你问哪个牌子的，我用GE的，最近做不出来啊

作者: 飞翔的十字架 时间: 2010-11-5 02:03

回复 7# cc1986
8 ^" a' |( r9 f- d8 k
请问你问哪个牌子的，我用GE的，最近做不出来啊

作者: cc1986 时间: 2010-11-5 09:32

回复 9# 飞翔的十字架 / d2 I# ~2 X) Z9 \
: e7 |/ R h0 C4 X5 B" h$ b4 r
Percoll 和 Ficoll我们实验室都有用，分离人的和大鼠的都可以养出来~~就是手册里面的常规操作，论坛里面也有不少讨论。

作者: sara 时间: 2010-11-8 00:10

谢谢大家~鞠躬~~

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