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标题: 关于IPS 细胞的饲养层 [打印本页]

作者: wangyimei 时间: 2010-11-13 20:13 标题: 关于IPS 细胞的饲养层

大家好，我有一个问题想请教一下，就是关于IPS细胞的饲养层，诱导IPS细胞是不是可以用ICR品系小鼠的胚胎成纤维细胞，看文献上说是要用孕13天的孕鼠，我的问题就是这个天数是严格的13天还是大约的天数就行，为什么要用孕13天的胚胎成纤维细胞，这个还有什么说法吗，期待解答！谢谢！

作者: 274996064 时间: 2010-11-14 14:56

他用的是13.5天的胎鼠，现在来说小鼠胚胎干细胞比较成熟用的都是这个饲养层。这个时期的胎鼠做出来的饲养层生长状态比较好，能够很好的支持干细胞的生长。要是用其他天数的就没有这么好的生长力了。

作者: english6 时间: 2010-11-14 16:53

人EG细胞分离_培养及其定向诱导为造血细胞的实验研究,在中国知网能搜到这篇文献，你先看一下不错的，希望能帮的到你

作者: wangyimei 时间: 2010-11-15 10:42

好的，谢谢大家的帮助，我查一下

作者: 12846168 时间: 2010-11-16 12:17

12.5-13.5天的都行。往前的话胚胎太小没法操作，往后胚胎太大，发育出来的杂细胞更多了。不过做MEF还是可以，我们用15，6天的做过，有点不好的地方就是以后传代能力减弱，基本上第三代就不增殖了。

作者: jhu132llh 时间: 2010-11-16 12:41

我们一般是用13.5天的胚鼠做的MEF经丝裂霉素C处理后用来做干细胞的饲养层的；太小的胚鼠小，不好做；太大的胚鼠杂七杂八细胞太多了，也不好做的。

作者: zhaonicholas 时间: 2010-11-22 10:59

请问该如何培养iPS细胞？我一点都不懂，谢谢了

作者: iyaofying888 时间: 2010-11-22 21:54

和培养ES一样，建议你先养一下R1

作者: woaiIPS 时间: 2010-11-24 15:25

13天小鼠胚胎内大小合适，而且细胞生长状态好，因此都用做。一般处理就是辐射或丝裂霉素处理.
但是目前研究很多feeder替代物，而且有人源的feeder
最新的建议关注下：）
强烈推荐看看应其龙 BMP4，代替血清和feeder就是他和他老板做的（smith超级大牛胚胎干细胞领域）包括最早LIF就是他老板研究发现的：）

作者: wangyimei 时间: 2010-12-15 05:36

谢谢大家的帮助和回答！

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