# b X) }4 j4 t, ? % P& p" R2 L- c: | f 【摘要】 目的 探讨前列腺干细胞抗原(PSCA)在人前列腺癌(PCa)和正常前列腺(NP)、良性前列腺增生(BPH)组织中的表达及其与临床分期、病理分级的关系。方法 采用免疫组织化学（IHC）链霉菌过氧化物酶法（SP法）检测26例人PCa石蜡包埋标本、10例BPH患者的前列腺切除标本及3例NP标本中PSCA的表达。结果 PSCA在PCa组织中表达阳性率为962%，其中强阳性率为885%。NP组织阳性率为667%（均为弱阳性）。BPH组织阳性率为700%（均为弱阳性）。PCa与NP、BPH组织表达水平差异有显著性意义（P＜001），BPH与NP组织表达水平无统计学意义（P＞005）。PSCA在PCa组织主要表达于癌细胞，细胞间质和肌肉组织均无表达；NP及BPH组织表达则定位于前列腺上皮的基底细胞层。PSCA表达水平与PCa临床分期、病理分级均无相关性（P＞005）。结论 PSCA是一个新的细胞表面抗原，可能在PCa的诊断、免疫治疗等方面具有广阔的应用前景。 1 {+ ` ^. ?$ P( ?, K! o0 h
【关键词】前列腺癌；前列腺干细胞抗原；免疫组织化学 9 G, x; }% ~4 T- [; K+ r( S. U Significance of expression of prostate stem cell antigen in human prostate cancer7 \% b A8 C$ H
: w, j: t/ P3 e; v" H
YANG YiFan, KONG XiangBo, GU XinQuan, et al ! f q. D- G; _# p8 e/ ~ * Y' \4 L7 y, x) G2 i/ i Department of Urology, the ChinaJapan Union Hospital of Jilin University, Changchun 130033, Jilin, China- h2 G# f- ?: B* {6 T" L" f/ \
. P) c/ |& t/ y$ Q9 V
【Abstract】ObjectiveTo investigate the expression of prostate stem cell antigen (PSCA) in human prostate cancer (PCa) specimens and its possible correlations with pathological grade and clinical stage of PCa.MethodsImmunohistochemical analysis of PSCA expression were performed on paraffinembedded sections from 10 cases of benign prostatic hyperplasia (BPH), 26 cases of PCa tissues, and 3 cases of normal prostate (NP) tissues.Results①The positive rate of expression of PSCA protein in PCa, BPH, and NP tissues was 96.2%, 70.0%, 66.7, respectively. The strong positive rate of expression of PSCA protein in PCa tissues was 88.5%, while that of BPH and NP tissues was zero. Significant difference of expression was found between PCa and BPH, NP samples (P＜0.01). No significant difference of expression was found between BPH and NP samples (P＞0.05). ②The expression level of PSCA has no relation with Gleason score and clinical stage (P＞0.05). ConclusionsAs a new cell surface marker, PSCA may have potential value for the diagnosis, prediction, and therapy of PCa. # J' d6 [) A7 s) Q: i* Q+ y" C( d1 T. [1 E( M6 d* R/ Z! G1 S
' x2 X2 e6 X+ b
6 w: ^4 _7 b$ d# h) X7 l0 u# V 【Key words】Prostate carcinoma (PCa)；Prostate stem cell antigen (PSCA); Immunohistochemical (IHC) 2 m2 ^) L( d- s8 z8 Z. s + [ d3 C4 C2 y6 o4 e! E 前列腺癌（prostate cancer，PCa）是欧美国家男性最常见的恶性肿瘤〔1〕，近年来，我国PCa发病率也随着人口老龄化而逐渐增加。前列腺干细胞抗原（prostate stem cell antigen，PSCA）是一种新近发现的前列腺肿瘤相关抗原，是一种前列腺细胞表面抗原，锚定于前列腺上皮的基底细胞层，在人正常前列腺（NP）及良、恶性病变组织中均有表达，尤其在激素非依赖前列腺癌（HIPCA）及转移灶中有高表达，有望成为诊断PCa的新瘤标和应用于PCa免疫靶向治疗的特异性抗原〔2〕。本文采用免疫组织化学链霉菌过氧化物酶法（SP法）检测PSCA在PCa和NP、BPH中的表达并探讨其与临床分期、病理分级的关系。: w$ K7 E7 ?3 A7 [6 w+ B
8 h7 v K0 I: `3 Q
1材料与方法0 k& k6 U, p. H* V
# ?9 V0 h' V9 l! [- z/ `- o
11资源来源我院2000～2004年间PCa石蜡包埋标本26例，年龄58～78岁（平均72岁）。根据美国Jewett、Whitmore及Prout修正的临床分期法：Ａ期7例、B期11例、D期8例，D期中有3例为双侧睾丸切除术后复发者，即为HIPCA，病理分级按WHO标准确定：高分化腺癌10例、中分化腺癌9例、低分化腺癌7例。取10例BPH患者的前列腺切除标本为对照组。NP标本3例，取自青年男性尸体（20～30岁），常规甲醛固定，石蜡包埋。每例标本连续切片3张（厚度4 μｍ），一张作常规HE染色，一张作HIC染色，一张作为阴性对照。所用的一抗鼠人PSCA单克隆抗体、DAB显色剂、免疫组化试剂均购自武汉博士达公司，以PBS代替一抗作空白对照。. }0 z/ }' u) X0 K3 G, {+ {
$ u, P# C% S4 X; O* { 12结果判定每张切片随机计数5个视野，以细胞核着色呈淡黄色至棕黄色或棕褐色作为阳性细胞，参照Remmele等的评分方法〔3〕根据PSCA阳性细胞染色百分率及着色深浅分别评分:（1） PSCA阳性细胞染色百分率≤30%为 1分，30%～70%为2分，＞70%为3分；（2）无染色为0分，淡黄色为1分，棕黄色至棕褐色为2分。标本最后评分=（1）（2），按分值将PSCA表达水平分为：0分，阴性；1～3分，弱阳性；4～6分为强阳性，将强阳性和弱阳性统称为阳性，分别计算阳性率和强阳性率。 ! |( ]- z+ Q" S+ t7 j( l; c4 W8 S' z % T3 s# \: y9 g 13统计学处理将所有数据输入计算机，用统计软件SPSS100处理，计量资料行χ2检验，若遇小样本资料采用Fisher精确检验法。3 X( o) H* {1 X; r. B7 x# p' T
. a) [& V* u& G6 s 2结果$ M3 v4 g8 C6 _4 l+ H, Y) c
; k }) H3 P' j- i* G
21PSCA在PCa组织中的表达PSCA在PCa主要表达于癌细胞，细胞间质和平滑肌中均无表达，PSCA在PCa组织中表达阳性率为962%，其中强阳性率为885%。NP组织阳性率为667%（均为弱阳性）。BPH组织阳性率为700%（均为弱阳性）。统计学分析表明PCa组织PSCA表达水平明显高于NP及BPH组织（P＜001）（表1）。PSCA在NP及BPH组织中均呈弱阳性表达，表达则定位于前列腺上皮的基底细胞层。阳性率分别为667％和700％，BPH与NP组织PSCA表达水平比较差异无统计学意义（表1）。 # L! O8 x+ L) V' v& H' C7 o: r . F' `. {, ^2 e" i8 X7 v) z 22临床分期、病理分级与PCa组织PSCA表达PSCA表达水平与PCa临床分期、病理分级均无相关性（P＞005）。3例HIPCA均呈强阳性表达（表2）。- B' |- L9 u$ t+ q
7 c) D4 M" h2 i' R% j/ `
表1NP、BPH、PCa组织PSCA的表达（略）$ a( q2 }# I, }) W, }, H; y
9 A4 O% Z1 e- H 表2临床分期、病理分级与PCa组织PSCA表达（略）4 F3 Q m" }4 O1 M. h) `
% R2 A/ d' |# L+ {8 Q. G
3讨论 . G2 F) j( V* Q( L1 t* v 8 g6 h* ~& L( X/ b4 v# c% ~& A5 J7 D; P/ B2 ~; Z
* F1 M0 d' a- @+ p
尽管近年在PCa的早期诊断发现和局限性PCa的治疗方面有了一些进展，但是在此疾病的处理上仍有许多问题亟待解决。BPH、NP、前列腺炎等往往也可检测到明显增高的前列腺特异性抗原（PSA），而一些早期的PCa和HIPCA血清PSA往往无改变，因此有必要发展对这种病变新的诊断方法〔1〕。近年来，出现了数种治疗PCa和其他肿瘤的新方法，如激活人体免疫系统、阻断血管生成因子、诱导凋亡、改变信号传导途径等，完成这些治疗手段，需要标识细胞膜表面的靶抗原，因此，识别和标记前列腺癌细胞膜表面特异性抗原对发展PCa新的诊断治疗方法至关重要。 ; l- K6 @" @( x, x # p! P& T8 b) c/ _) i Q9 r/ L0 [ & B0 ~0 o6 A& ^- Y6 }" ~; @6 Q# V7 U# R2 o& `
PSCA是Reiter（1998）等发现的一个PCa相关肿瘤抗原，因它与干细胞抗原2（SCA2）有30%同源性而得名，是一种理论上类似造血干细胞抗原的细胞表面分子，存在于前列腺上皮基底细胞膜上〔2〕。 ( M$ [1 a3 c0 U' V% j 4 i# w' I, C, P5 y& D9 N( {) E( ~1 E4 H& c1 j% i* S/ q
, R- U& {* h5 y7 g! X9 ]% x 目前普遍认为，由前列腺干细胞群分化出基底细胞、外分泌细胞等不同类型的前列腺上皮细胞。如果这一分化过程出现异常，最终将导致PCa发生。目前对于PCa起源于基底细胞还是外分泌细胞尚存争议。本研究观察到PSCA在667%（2/3）NP标本中呈弱阳性表达，表达定位于前列腺上皮基底细胞层。但PCa标本阳性率达962%，其中885%呈强阳性表达，且表达在癌细胞，而间质及肌肉组织均未见表达，这与Reiter等〔2〕的结果一致，为PCa起源于基底细胞层的假说提供了有力的证据。深入研究前列腺干细胞、PSCA与PCa之间的关系及其分子机制，可能为PCa起源、发病机制研究及早期诊断提供新的切入点。! R5 r2 Q+ R+ {! |: d$ {- T3 a
" w( _( ^3 |& s$ J2 H
1 ~5 I' u% E$ c Lam等研究表明PSCA在前列腺癌活检标本及转移灶中也有特异性高表达〔9〕，据此可用于鉴别诊断PCa高危患者，并且针对PSCA的单克隆抗体可以早期识别、诊断PCa。然而，PSCA要作为一种重要的工具应用于PCa的诊断仍需要通过进一步的动物实验和临床试验来验证。% `! {! l8 {$ y' z# f# j
* ]' u5 o) M a8 @
- Z# M1 p2 W0 @
【参考文献】 * }- N' m" X9 t7 d9 t* M% e7 W 1 Lalani elN，Laniado ME，Abel PDMolecular and cellular biology of prostate cancer〔J〕Cancer Metastasis Rev，1997；16(12): 2966 7 {0 }8 N$ ~% l9 b' Z8 z; R% G+ D9 I5 s
; Z7 A8 g; J) n 5 R1 T! S# z: t9 h: o6 i 2 Reiter RE，Gu Z，Watabe T，Thomas G,et alProstate stem cell antigen: a cell surface marker overexpressed in prostate cancer〔J〕Proc Natl Acad Sci USA，1998；95(4): 173540; v- J# m4 N8 Z L% i
) n! u1 p- v4 K/ I* g* {& {. b( d * E" z+ K% F- T4 B. R7 E) y3 `& b1 k" O" S( o3 G
3 Dannull J，Diener PA，Prikler L,et alProstate stem cell antigen is a promising candidate for immunotherapy of advanced prostate cancer〔J〕Cancer Res,2000；60(19): 552285 s5 f" T" N6 A0 V$ t" G& ]
% M. h9 s' _/ M1 G' ?. I: L; }! J4 \
- q, K6 c. M# {$ O" t: ]1 m 4 Ross S，Spencer SD，Lasky LA,et alSelective expression of murine prostate stem cell antigen in fetal and adult tissues and the transgenic adenocarcinoma of the mouse prostate model of prostate carcinogenesis〔J〕Am J Pathol，2001；158(3): 80916 0 k* q1 X2 e" ?. h: j. o+ U8 }$ r% ~- Q E+ O
! [9 D1 i/ T5 i" M( v: o* H3 z3 r6 t, E7 i: B
5 Ross S，Spencer SD，Holcomb I,et alProstate stem cell antigen as therapy target: tissue expression and in vivo efficacy of an immunoconjugate〔J〕Cancer Res，2002；62(9): 254653 0 `3 p, j, V+ E$ `1 \+ d, G/ {9 U+ h6 {' N. G% S) B- h8 p
/ T5 {$ S) Y/ k6 a6 z1 g+ O5 y" o9 z6 n9 {2 x% g- F# {
6 Saffran DC，Raitano AB，Hubert RS,et alAntiPSCA mAbs inhibit tumor growth and metastasis formation and prolong the survival of mice bearing human prostate cancer xenografts〔J〕Proc Natl Acad Sci USA，2001；98(5): 265863 3 C6 h; b/ V1 ~ ! S8 d* e* V0 s' s * h; k3 T( v& K0 E' B + P; l, S# U8 p/ u 7 Thomas G，Yamashiro J，Shintaku IP,et alProstate stem cell antigen (PSCA) expression increases with high gleason score，advanced stage and bone metastasis in prostate cancer〔J〕Oncogene，2000；19(10): 128896 # p$ `- |) X$ Y! f _ $ ]. A+ Z8 t7 K) Y" ]4 [+ H* _
6 e9 L% u7 @* }- B6 A
8 Han KR，Seligson DB，Liu X,et alProstate stem cell antigen expression is associated with gleason score，seminal vesicle invasion and capsular invasion in prostate cancer〔J〕J Urol，2004；171(3): 111721 " N5 L* a+ Z7 |6 C1 O: J. ^6 r) J- [: Q, s i! c. m
! y: X6 G9 t. I- _) `0 M, b8 `2 \* o# t+ Z1 m
9 Lam JS，Yamashiro J，Shintaku IP,et alProstate stem cell antigen is overexpressed in prostate cancer metastases〔J〕Clin Cancer Res，2005；11(7): 25916作者: 龙水生 时间: 2015-5-28 17:10