干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 养的AMSC出现黑点 [打印本页]

作者: 流云阿凯    时间: 2010-11-22 10:59     标题: 养的AMSC出现黑点

[attach]17280[/attach][attach]17281[/attach]9 M% @" b3 D+ S$ \4 C
养的细胞刚到前几代就出现细胞核周围很多黑点点,也不想污染的样子,是细胞老化,还是?头疼啊!好像还有一个细胞核中有两个细胞核!
作者: xiaodiao123    时间: 2010-11-22 11:42

一个细胞核中有两个细胞核,应该是因为细胞在分裂和增殖吧,这个关系不是很大。但是你说的黑点,我养的细胞中也有,传代次数较多的时候会出现,再就是培养基用国产的时候也会出现,进口的a-MEM就会好很多。
作者: feifei105    时间: 2010-11-22 21:31

我觉得是支原体污染,这种黑点以前一直以为是黑胶虫,但我们实验室一直都是保证国外进口血清,都是老板亲自从美国带回来,最近一段时间也发现有,黑点多的时候瓶底感觉像铺层沙子。支原体污染特点就是细胞增殖缓慢,早期根本看不出来,培养基不浑浊,你可以做下鉴定,用染色方法Hochest染DNA,如果有支原体细胞核上也有小亮点,周围也全是小亮点,细胞边界不清。如果有精力可以做专门支原体PCR鉴定,这个最可靠。可以试下庆大霉素和环丙沙星,SIGMA,INVITROGEN都有专杀的试剂。
作者: 流云阿凯    时间: 2010-11-23 09:33

回复 3# feifei105
/ Y( i* p$ O& S请问如果加庆大霉素的话,量怎么控制?
作者: luoye1986    时间: 2010-11-23 09:54

我觉得与血清也有一定关系吧
作者: andyz0922    时间: 2010-11-24 07:49

传代  试试看  一开始的几代 都这样的  看起来不太干净  越传应该 越干净 透光度越好
作者: luomx07    时间: 2010-11-24 17:12

感觉那细胞的代次较高,细胞已经老化了
作者: 2006goodluck    时间: 2010-11-27 17:48

我的细胞现在传到第十代,也出现了这样的问题。在高倍镜下可以看到黑色小点做布朗运动,到底是什么我也不是很明白。有人说是支原体,有人说是黑胶虫,还有人说是球菌。建议大家培养一瓶全培养基,如果是血清或培养基的问题就好说明问题 了




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5