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标题: 我的ips细胞克隆中间有洞,一转到matrigel上就分化:( [打印本页]

作者: sannia    时间: 2010-11-23 20:17     标题: 我的ips细胞克隆中间有洞,一转到matrigel上就分化:(

郁闷那!有哪位遇到过类似情况吗?
5 g2 G6 j1 _, x8 Z, l! \0 Ton MEF
: H0 v$ {. ^) j6 A) H[attach]17431[/attach]
, [& c) {/ l/ K$ C  Q- t
  l' Y% Z+ B4 x[attach]17432[/attach]
# A1 P# x: ~* _8 E/ I
- Y, |8 W% l3 ]0 Z& c1 a0 O! v- zon Feeder free
! ]! Y0 t" @1 {0 k6 Z6 ?2 ?0 S- Z[attach]17433[/attach]
* l% r7 b, P. X2 p3 t3 \2 E
" h# \( X- Y4 Q$ W[attach]17434[/attach]
作者: woaiIPS    时间: 2010-11-24 00:18

首先问下:您的ips是小鼠的吗?
  g$ |, j' l" w1 ^6 q9 D6 H3 s7 H. P2 a- O$ c
如果是个人感觉克隆状态不是很好:)
作者: sannia    时间: 2010-11-24 04:45

是人的细胞系。我也不知到哪种是好哪种是不好,唉
作者: woaiIPS    时间: 2010-11-24 23:28

怪不得的:)
: q2 U5 Z: f! o3 G; {8 U如果是人的细胞系话 还算说的过去 ,如果小鼠 ES或IPS不是这样的。
' E( v# h6 C7 x% r' \: S! e长的要更致密,边缘很清晰,克隆要小些园些 而且立体感特别强 ,
0 w2 Q4 |" Z' ?4 ?7 G* u% E小鼠的EPIBLAST的ES 或不能生出嵌合体的小鼠ips细胞状态 和您的一样 特点就是 细胞铺平 6 A3 C" c; F" a
立体感不好:)$ G$ l+ H$ C# r4 p% T
9 w& T- F/ j+ s8 g3 Y- q# E1 C
建议你用人源的feeder会好些
作者: 开心果王    时间: 2010-11-25 11:20

楼主鉴定过没,感觉你的iPS克隆形态不是很典型。应该有很明显的核可见,核浆比高。感觉像pre-iPS,或者是有染色体突变。因为我最近在养的hiPS也是感觉有核型突变,有癌变的倾向!
作者: sannia    时间: 2010-11-25 22:22

O:(
; j" b4 W& {* {怎么去鉴定iPS or pre-iPS啊,我刚入门,不懂得太多。
作者: sannia    时间: 2010-11-25 22:29

呵呵,各位 能不能给我show一些人的养的比较好的iPS克隆啊?昨天我问了做这个细胞系的同学,她说这个细胞系特别敏感,比较难养,哎
. ]  j5 J" s6 M9 `) t6 g0 E+ C# g% M' U
换溶液先还要加温,不能冷的直接加进去。
作者: mmssyyee    时间: 2010-11-26 20:20

看着确实很像pre-ips,你做过ap染色吗?
作者: sannia    时间: 2010-11-26 23:52

没做过,下个星期试试,多谢各位




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