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标题: 细胞七八天就死了 [打印本页]

作者: cheese    时间: 2010-11-26 16:15     标题: 细胞七八天就死了

我养的小鼠原代骨髓间充质细胞,前三四天看着还好,成长梭形、纺锤形,并且细胞有增多,之后就细胞出现很多分支,大概在十天左右细胞就看不到细胞了,没看到有细菌真菌污染。不知道是哪里出了问题,请高手指点!
作者: zhuanzhuan    时间: 2010-11-26 16:27

是不是融合了呢就看不到单个细胞了呢?
作者: zhuanzhuan    时间: 2010-11-26 16:27

是不是融合了呢就看不到单个细胞了呢?
作者: cigoo    时间: 2010-11-26 16:57

有没有大量的细胞碎片或凋亡小体出现?是不是凋亡了呀?有没有保留下相关照片,传上大家看看
作者: xiaodiao123    时间: 2010-11-26 17:04

中间有没有换过什么培养物质啊
作者: cheese    时间: 2010-11-26 20:05

回复 5# xiaodiao123   I$ M& Q3 D' E( m. @

' m) U# A% A8 X, E# e0 `; `7 r' ]8 U" ~& U6 y$ H
    没有换,一直用的10%FBS的低糖DMEM,首次72小时换液,以后两天换液
作者: cheese    时间: 2010-11-26 20:06

回复 3# zhuanzhuan
0 C+ ]+ Q1 k6 b1 q  _4 K' |1 W
" g7 W4 Z  @, S  a+ u
) @/ h2 z- L- [    只有局部融合,然后就是单个的细胞了,我用的是全骨髓贴壁法
作者: 飞翔的十字架    时间: 2010-11-27 05:36

首次换液时间太晚了, _7 H/ x; T  E) h4 n# @( A
太多杂细胞肯定影响MSC的
作者: jhu132llh    时间: 2010-11-27 11:18

换液时间倒是应该没什么问题的2 ]2 t' j/ I  K1 |) X$ M, c8 r* U
在看不到细胞之前细胞有什么样的症状吗,比如出现大量空泡,出现大量凋亡小体。。。
% ]# p) [* [7 ]* p9 p; r可能会存在细胞融合的可能的
作者: 267318024    时间: 2010-11-27 12:14

第一,最好传几张图片上来,让大侠们看看;
! Q, ^6 c$ y! {- m! O第二,你换液的时间是怎么样的,培养基的状况如何,酸碱度控制的怎么样,有没有出现污染的情况;8 a2 h8 z; a* @
第三,细胞生长状况在前几天是怎么样的,空泡,脂滴,或者凋亡小体,个人觉得可能是培养基的问题,可以提升培养基的浓度,15%,或者改换更好的培养基。
作者: get0715    时间: 2010-11-27 13:16

时间长了细胞才死亡,说明很大程度上问题出在培养基上,你的培养基成分需要添加更多的营养成分。




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