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标题: 慢病毒包装-磷酸钙法试剂 [打印本页]

作者: yuangaoqian 时间: 2010-11-29 11:21 标题: 慢病毒包装-磷酸钙法试剂

大家好！现在我们想利用磷酸钙法包装慢病毒，需要两种试剂：2MCaCl2和2XHBSS，之前自己配过，但效果不好，所以想请各位帮帮忙，这两种产品是否有商品化的？哪个公司的比较好，最好有货号，非常感谢！

作者: exin11 时间: 2010-11-29 11:25

我们也是自己配置的，还行，主要是hbss的ph值很重要。

补充内容 (2010-11-29 11:25):% x. Y5 V9 Q( W" g8 ~4 _) m! q
一般为7.2

作者: yuangaoqian 时间: 2010-11-29 11:28

谢谢！我之前配的CaCl2呈黄色，防止一段时间后有黄色沉淀析出，所以不敢用，害怕影响实验进程，所以想买商业化的。

作者: yuangaoqian 时间: 2010-11-29 11:32

exin11，非常感谢，不知可否将你们配制HBSS和CaCl2的具体方法告诉我呀？我看看是否我们的配制过程有问题，谢谢！

作者: cicadacjk 时间: 2010-11-29 17:38

所有试剂都要用进口的，pH要精确到百分位。

作者: exin11 时间: 2010-11-29 17:41

回复 yuangaoqian 的帖子
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没问题的，cacl2要求不太高，主要是hbss，cacl2用dpbs溶解，hbss要好好的调一下ph，我之前说的7.2是我们实验室摸索的，不同环境ph要求不一样，要自己做病毒滴度测定。

补充内容 (2010-11-29 17:44):
用dpbs溶解11 g CaCl2 .H2O，定容至20 ml。用0.22 μm滤器过滤除菌，分装成1 ml的小份，贮存于4 ℃。$ R* u4 W0 p+ Y# c& a3 c

作者: yuangaoqian 时间: 2010-11-29 17:57

好的，我再试试，非常感谢！

作者: tanguixiang 时间: 2010-12-1 22:16

我做也是用的钙转做的慢病毒，效果还不错，10CM盘制备20ML病毒，可以达到2*10 6 IU/ML
基本上够用了，试剂都是国产的，PH到7就差不多了，一次配500ML用几年。。。

作者: yuangaoqian 时间: 2010-12-3 08:47

好的，非常感谢大家！

作者: sailor 时间: 2010-12-29 14:56

碧云天的钙转试剂盒用着还可以但是建议还是用fugene-HD

作者: yuangaoqian 时间: 2011-1-10 10:05

非常感谢

作者: ljzmy82 时间: 2011-7-20 17:34

学习了

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