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标题: 间充质细胞培养 [打印本页]

作者: liqinzhan 时间: 2010-12-1 12:03 标题: 间充质细胞培养

1、无菌抽取人的骨髓20毫升，6 L" ]% ^0 {4 Q$ `
2、离心3500转*10min，取上清放入无菌培养瓶
3、剩余红细胞加pbs按1：3比例混匀，再离心3500转*10min& `6 ?& ^2 l/ {, q  J9 {7 W/ P) K
4、吸除上清后轻轻将白细胞层吸除放入无菌培养瓶中，加入自体血浆和培养基混匀+ [; \5 d% H* d1 u( C8 l4 [
5、放置37°二氧化碳培养箱内培养5天。
（第一次做没经验，怕取的白细胞少，重复洗了两遍）
   今天是第6天，早上去实验室看了细胞，里边全是红细胞，看不到一点贴壁细胞，请问我现在能给它换液吗？？？

作者: why121 时间: 2010-12-1 12:48

你是养红细胞？为什么不用裂解液呢骨髓MSC很多文献都有介绍方法的哦

作者: 呼吸 时间: 2010-12-1 12:57

培养前应该把红细胞裂解掉，而且你用的培养基成分是什么，是否加了重要的因子。正常3-4天就可以看到贴壁的（好的话，再过个一天两天就可以传代了）。

作者: liqinzhan 时间: 2010-12-1 13:28

怕取白细胞少，所以就多吸了点红细胞，我们每次都是这么培养的，都好好的呀，不知道这次怎么只看到红细胞没见有贴壁细胞，是不是因为红细胞太多看不到贴壁的呀？？？？？本次采用的是全水培养法，没有用淋巴分离液，用的培养基是DMEM。

作者: daviddow 时间: 2010-12-1 14:42

第六天你都没有给细胞换液，太可怕了吧。第二天你就应该给细胞换液。

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