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标题:
谁做过脐带血的DC-CIK培养？
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作者:
shiqingxi
时间:
2010-12-2 08:57
标题:
谁做过脐带血的DC-CIK培养？
脐带血和外周血的脐带血的DC-CIK培养之间有区别吗？脐带血里的DC，CIK培养较外周血怎么样啊？哪位大虾给点意见，谢谢！！！
作者:
呼吸
时间:
2010-12-2 09:32
没做过脐带血的，只做过外周血的CIK-DC培养，我也想知道具体有什么区别。
作者:
山风
时间:
2010-12-9 17:36
我也想做啊，有没有步骤啊
作者:
xuchao717
时间:
2011-7-19 12:24
恩 我也想知道脐血的CIK怎么制备？应用在临床上的疗效怎么样？用不用配型的？多次输注后会不会有什么副作用的？
作者:
yang179
时间:
2011-7-19 23:38
最近开始在做这个方面的东西，还不是非常了解。上传一篇文献，供大家参考。脐带血诱导CIK，其CD3,56双阳性好像更高。[attach]30534[/attach][attach]30534[/attach][attach]30534[/attach]
作者:
蓝O海
时间:
2011-7-20 09:42
新鲜的脐带血经过离心后去除血浆，加入1:1的pbs用ficoll1:1分离出单个和细胞，加入cik诱导因子，放培养箱培养，隔一天离心换一次培养基，一周后即可得到cik细胞，dc细胞得做taa接枝。
作者:
Sarge
时间:
2011-7-21 20:43
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蓝O海
的帖子
2 u ^/ t f/ D3 B: O ]
# k9 l& B2 Q( J. c- R, P' x
加入PBS混匀的话，是与谁的比例是1：1？隔一天离心换培养基，离心力是多少呢？感觉对于细胞来说，频繁的离心更换培养基可能使污染的几率升高，而且过多的离心对于细胞也是一种伤害。
作者:
蓝O海
时间:
2011-9-6 14:48
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Sarge
的帖子
* E) A! `1 P. _+ e7 ?) [+ {. e
+ g0 e0 [: |/ R
混匀后的稀释液和ficoll的比例时1:1.ficoll分离时是400g，换液时100g即可。
) u* h# q! {5 ?. n5 q6 A1 T/ U5 ?
隔一天换液，我是说的有点笼统，其实具体换液的目的是保证细胞的正常生长，可以具体情况具体实施，没有那么严格的隔一天就得换液。如果培养基的营养可以维持细胞的正常生长，就不急着换液。
+ x% {* D$ Q- o x) R! Y
作者:
joesiezhao
时间:
2011-9-7 20:26
脐血cik免疫原性低，基本上不用配型，因此理论上讲是可以做异基因治疗的，我们在研发阶段，具体细节不便多聊。
作者:
yjguan
时间:
2012-7-28 16:59
我想下载4楼所附的文献, 包包不足,怎么办?
作者:
细胞海洋
时间:
2012-7-29 20:21
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yjguan
的帖子
& H1 h1 D- R3 }) B: W9 J
) J4 y3 g6 o0 B! Q$ R
参与讨论 获得积分
作者:
yjguan
时间:
2012-7-31 14:15
知道了,谢谢!
作者:
莫邪小仙
时间:
2012-8-15 09:54
正在做脐带血的CIK-DC，首先是分离出单个核细胞，然后培养2-4h，贴壁细胞用来DC培养，悬浮细胞用来CIK培养。CIK要加入细胞因子诱导才能得到，DC细胞也要加入GM-CSF等因子，才能获得。收获成熟的DC细胞后和CIK一起培养。
作者:
deshenglll
时间:
2012-11-22 16:52
收下。谢谢楼主的分享。
作者:
gengtongyu521
时间:
2012-11-23 11:40
脐血CIK增殖活性很高的，培养方法跟外周血一样的，只是增殖会很快，不用配型，因为脐带血抗原性弱，可以直接异体回输的。
作者:
回到从前
时间:
2012-11-23 12:22
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莫邪小仙
的帖子
) u; A% \6 k% R9 W$ @! o
# O' X8 X0 K4 U p% y6 U) T4 d/ v
有没有具体的操作过程 麻烦给我一份
huhua_0314@163.com
谢谢
作者:
莫邪小仙
时间:
2012-11-27 16:01
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gengtongyu521
的帖子
) ~( P: l; W/ n0 [) j$ l a
, y7 l9 s( H9 k* A7 V( G
麻烦请教下，为什么同样的方法脐血CIK要比外周血CIK增殖快？
作者:
小公
时间:
2012-11-28 08:54
学习
作者:
mkhorse
时间:
2012-11-28 13:29
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莫邪小仙
的帖子
, \5 E7 ^, G. q2 x# N
3 o4 i( f: s1 ~9 I* p/ o
看起来，脐带血的CIK-DC与外周血的培养步骤是类似的，那么它们所用的细胞因子是不是也是一样的呢？还有DC与CIK混合之前需要加入特异的抗原么？
作者:
莫邪小仙
时间:
2012-12-3 16:33
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mkhorse
的帖子
; g, L6 K: s r8 x% T
4 N* n0 ~0 l3 a3 a9 c' L2 E" i
刚开始做，所以就直接用了外周血的培养方法。所加的细胞因子也都是一样的，外周血和脐带血都是加的CD3单抗和白介1、2，待DC成熟后与CIK混合，使DC成熟可以加TNF-a可以加肿瘤抗原，至于要不要加特异性的抗原就要看你的目的是什么，一般来说要针对某种肿瘤都会加这种肿瘤的抗原，我们是直接从肿瘤组织块中分离得到肿瘤细胞然后再裂解得到抗原，然后负载DC促成熟。
作者:
莫邪小仙
时间:
2012-12-3 16:34
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回到从前
的帖子
, G; j0 M5 n3 P; T: b k* N$ H/ H
* b) ~* w# S. D {
这个。。。都是在研发阶段，太细节的东西不好透露啊
作者:
回到从前
时间:
2012-12-4 12:20
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莫邪小仙
的帖子
/ s* T' @, r1 R& |9 F; F
/ G7 @# d9 G) s) v8 n
哦 那就多交流吧 呵呵 可以加QQ
作者:
wjp130
时间:
2012-12-21 10:42
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蓝O海
的帖子
6 b4 Z* R7 @0 n' T( M4 k
( S5 i- x8 t& w
用细胞袋培养吧，不用离心，只需添加培养基和细胞因子就行了，简单，安全。
作者:
CELL007
时间:
2012-12-23 21:39
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joesiezhao
的帖子
* v' r+ S; R% G! w1 O5 c
& R2 v* ~; E$ e2 o( C* ~) i
我也做过脐带血的DC-CIK培养实验，但是不是每一份脐带血都可以养出来，是什么原因呢？求指教
作者:
细胞海洋
时间:
2012-12-24 08:06
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CELL007
的帖子
: i) O6 U$ J) \# P. P, H
" z$ [. i6 q( Q" d8 T1 Y- W: B, l
建议你发新帖提问
作者:
pengxuleo
时间:
2013-12-11 14:33
脐带血来源的DC和CIK细胞，在培养方法上和外周血来源的，大同小异。
$ ~, o) y$ f, k' e/ C2 {
因为脐带血和外周血在培养DC和CIK时，所用到的细胞主体还是相应的系祖细胞，脐血也不是用的是造血干细胞。
1 G l! x3 `1 e' x% C5 i" B, ?
因为造血干细胞在脐血中不占主体部分，如果是造血干细胞来源的DC-CIK的话，培养方法会有所不同，如果只是
* H: y: ]* O% x6 c0 x
简单做一个梯度密度离心后进行培养的话，除了细胞活力好些，免疫原性低些外，其他的差别不大，个人见解，不对的地方
; u) s( O, P w" f% a7 W
欢迎指正
作者:
lasighter
时间:
2014-2-7 16:12
学习中，也想做呢
作者:
wf78365421
时间:
2014-2-16 13:01
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shiqingxi
的帖子
9 G. D" r: D! Q; W% h
& s' z# ~. o! x% J% w& m" B/ W
与外周血的一样的方法！
作者:
yanglixia1984
时间:
2014-2-19 20:19
包包是什么怎么获得呢
作者:
细胞海洋
时间:
2014-2-20 08:37
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yanglixia1984
的帖子
& ]$ F/ s; M7 r
$ ?) r( {5 j% E' f
参与讨论
作者:
momoenn
时间:
2014-3-3 17:01
脐血做CIK，长得比外周血更快，状态也比较好，可能是因为病人本身的状况就不太好吧
作者:
yanglixia1984
时间:
2014-7-15 11:50
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pengxuleo
的帖子
5 L4 `* w8 o& k
! z( \! f! a v2 B5 z! ^
脐血和外周血的培养的CIK
3 z* z2 V: x' E# z( j' O
在培养方法上大同小异，究竟异在什么地方呢
: }2 f1 j2 ]+ I
如何培养呢
作者:
yanglixia1984
时间:
2014-7-15 11:50
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wf78365421
的帖子
" O; s7 z- \) _. u
6 ^* Y* G( s5 R# x! c' w1 C
求方法
作者:
pengxuleo
时间:
2014-7-15 21:40
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yanglixia1984
的帖子
: z8 l9 B$ j3 U& X8 l2 ^, J0 G" A
! m5 W$ S+ W. _; w; N' _
在外周血CIK培养中使用ifn-r,cd3 ab，IIL-1a和IL-2，这是常规，也是报道最多的
) I; l8 O( A4 m. W+ j5 c7 w7 y: ^
脐带血的话，在因子的选择上个会有些不同，可能会使用IL-15，SCF TPO等等，也是paper中看到的。
作者:
yanglixia1984
时间:
2014-8-19 17:03
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pengxuleo
的帖子
0 r5 f8 Y% @/ C, t- A
1 }5 s' q+ o0 s* U
为什么用不同的因子呢，ifn-r,cd3 ab，IIL-1a和IL-2，IL-15，SCF TPO等这些因子都有什么特定的作用呢，为什么要用这些呢
作者:
chenguangyu
时间:
2014-8-20 11:50
脐血的dc与骨髓血来源的dc更相近。cik在体内与外周血培养的作用也有些不同，一个以诱导坏死为主，一个以诱发调亡为主。
作者:
chenguangyu
时间:
2014-8-28 20:06
方法与外周血的一样。脐带血培养的DC与外周血来源的有些不同。脐带血来源的DC与髓源DC比较类似。
作者:
rytyn
时间:
2014-10-20 17:30
收下。谢谢楼主的分享。
作者:
chxq
时间:
2015-4-14 18:43
操作步骤就得具体
作者:
chenlin080102
时间:
2015-4-29 21:47
做法都一样，最难的是脐带血怎么将红细胞去除干净
作者:
ssyt
时间:
2015-6-8 14:41
有区别，脐带血的更好养，双阳性率更高。外周的受供者当时状况的影响大一些。
作者:
sdzhxq
时间:
2015-7-4 10:34
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chenguangyu
的帖子
) v) u- d+ X l; ]4 m9 [! G
: g1 {/ R& A a4 r' O
我们按照培养外周血的方法培养脐带血，感觉不如外周血的好培养
作者:
yuanyecat
时间:
2015-7-4 11:25
脐带血dccik的免疫原性基本是没有的，所以用来做异基因治疗很不错。但是脐带血的量太少了，做dccik的数量要求可能达不到。怎样扩增到临床数量级是个大问题。如果各个不同来源的脐带血混到一起不知道效果如何？没做过实验
作者:
zfn0843086007
时间:
2016-3-10 09:48
新鲜的脐带血经过1300rmp20min离心后收集血浆，剩下的红细胞层加入pbs进行1:1稀释，加入ficoll1:3进行离心，离心力为1800rmp18min,分离出单个核细胞，用pbs洗涤l两次，离速度分别为1600,rmp12min，1300rmp12min ； 将获得单个核细胞用培养瓶培养三个小时，将T淋巴细胞和单核细胞分离开，悬浮细胞加入CIK细胞培养因子放培养箱培养，贴壁细胞进行DC细胞诱导培养，
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