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3 inhibitors medium used for rat ESCs
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作者:
carolshen
时间:
2010-12-3 22:03
标题:
3 inhibitors medium used for rat ESCs
本帖最后由 carolshen 于 2010-12-3 22:03 编辑
' Y5 d: b3 r6 }) H8 Y) R( V* {
' U" k3 H) B, A% _
据说应其龙的3i 培养基，现以由millipore代其生产，但苦于查找不到，所以在此咨询下，不知有人定过商品化的3i medium ，有的话给个这方面的信息吧 ，谢谢啦
作者:
carolshen
时间:
2010-12-4 13:13
自己顶下 呵呵 希望有知道的给个提示哈
作者:
carolshen
时间:
2010-12-8 15:16
自己已经找到了答案 也公布下，希望对他人有所帮助，这些产品在stem cells公司有售，网址链接如下：
8 L$ g( g; T9 t' D) g0 _/ F( W8 w
http://www.stemcellsinc.com/Tools-and-Technologies_SC-Proven-Product-Catalog/istem
作者:
ppcl2
时间:
2010-12-12 07:30
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carolshen
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' d. i$ F/ b5 a; }( h5 E
/ u9 `2 w. K" ]6 P% Y# b
这个太贵，用起来成本太高！
, W1 k% r+ `" V1 f' `- U# k
其实自己买2i添加就很好了，一般情况2i已足够好了，有钱可以加3i，俺试过，加了2i的培养基就已经90%以上的小鼠胚可以诱导出非常高校ES了，有了2i使得做ES细胞株犹如家常便饭，非常powerful。
) D1 \" U# ]1 j) _( y
2i:: PD0325901, 1 mM with CHIR99021, 3 mM.
作者:
carolshen
时间:
2010-12-12 16:11
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ppcl2
的帖子
% j& c3 N* ^' l& p5 O
: v0 Y+ o7 A, w% b3 l0 N( q' I# k* ?
嗯 你是做小鼠的吗？
4 [. g8 c9 A- o$ W& T. A/ B
我们课题组要做鸡ESCs，对于这个配方不清楚它的作用有多大，所以老板让试一下已经商品化的这个产品，如果有效果了，自己再配。可以把你自己的配方发我一下，学习下吗？
& F2 A! K2 G# Y
我的邮箱是：
shf222@gmail.com
' Q2 c7 d) A! @' [; }$ P( |. I1 J) ?
可以在你的回信中简单介绍下你吗，以及你现在的课题，相互交流下 ，主要是我向你学习学习了 呵呵，我刚起步。 如果可以的话！
) V. u1 h9 f% @) s3 B
谢谢哈！
作者:
ppcl2
时间:
2010-12-14 00:52
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carolshen
的帖子
7 K! e, B9 z$ w+ Y9 i/ g% w' ?* _: h
! X6 L5 `+ a+ v$ Y' V
2i对哺乳类有效，对鸡ESCs是否有效很难说，鸡ESCs的调控好像研究的不大清楚？
: Z% ]7 ]3 F9 X
你需要试不同的inh组合和浓度，对不起，俺对鸡ESCs没有研究。
作者:
carolshen
时间:
2010-12-14 09:41
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ppcl2
的帖子
& g$ m, ]* ? `; m
1 Z8 T& u/ N: @9 S
没关系的，我是借鉴小鼠，大鼠和人的方法去尝试的，毕竟是一种尝试嘛，所以就想问问你的实验方面的 呵呵
作者:
huanmiao2005
时间:
2010-12-14 20:26
请问楼上的 在knockout的培养基中直接加入2i 就能保持MES未分化吗 还是要用N2B27呢
( G) T+ w+ O9 k# c
作者:
ppcl2
时间:
2010-12-15 06:55
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huanmiao2005
的帖子
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! ^! H6 B [. U: D' j
用Invitrogen的KSR加LIF再加2i，在有feeder的情况下，可以非常有效的抑制从3.5ICM诱导ES过程中细胞的分化，普通的ES培养没有必要添加2i，当然加了更好。
作者:
ppcl2
时间:
2010-12-15 07:01
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carolshen
的帖子
& V: m- ^1 C: e
% h( U1 c: J2 X& w8 V$ o; n
鸡的ES细胞还是有些报道的，法国的Pain做的还可以啊，貌似并不复杂，你俺他们的方法拿不到ES细胞？
/ W* O/ f& ~0 {" N
国内浙大张才桥等人好像也在弄这个，问问他们，没必要这么浪费钱，调控通路不大一样，大鼠和小鼠都差别老大呢，有哪钱不如自己做点实验，找出更有效的细胞因子，这本身就可以发paper，呵呵。
作者:
carolshen
时间:
2010-12-15 10:30
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ppcl2
的帖子
1 V: t- h7 \/ w2 ]# }: K# K. O, {# d
4 y4 `: `2 F% Z o6 K, J9 W" V& B2 j3 K
这个是，国外做出来的比较多，法国的pain 还有Petitte，日本也有一个Horichi，等，但是比较他们的方法发现，他们做的其实是比较类似的，并且均是以上个世纪小鼠的为参考来做的，而现在看到的这个3i ，在人， 小鼠，大鼠上都有应用了，所以就想试试，呵呵。张才乔做的是cPGCs吧，和ESC的培养还是有区别的。扬州大学的李碧春做这方面的也比较久了，但是她今年发表的文章却也是PGCs方面的
! w1 b. i4 F' Z9 z+ b
呵呵，谢谢你的回答哦，呵呵
作者:
ppcl2
时间:
2010-12-16 01:57
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carolshen
的帖子
& k8 w" D* h c
* N# I. T, r+ _$ ^1 H6 p
你可以找日本広島大学 松田治男（Haruo Matsuda已退休）或古澤修一（Furusawa, Shuichi）要点鸡的LIF或表达载体，自己纯化，在加2i或3i，bFGF之类的因子试一下，看看效果，看起来不难，这个ES培养看起来比PGC培养更容易！Pain 还有Petitte都是Etches R的人，但比Etches R还是差了一大截，可惜Etches搞公司去了。不管是Pain ，Petitte还是Furusawa水平都挺一般，所以这个鸡的ES培养因该是很简单的打酱油没问题。
作者:
carolshen
时间:
2010-12-16 13:14
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ppcl2
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& `& T. u: `8 E) r; \
7 F7 x* ^8 k5 l+ T' \
膜拜下，你对这些方面的研究了解的很多呀，呵呵，值得小弟多多学习，还望兄台不吝赐教哈。我只看过这些方面的，但他们之间的关系还没想过去弄清楚来着，呵呵
作者:
ppcl2
时间:
2010-12-17 00:27
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carolshen
的帖子
Q3 y0 s3 B2 ^3 @6 w& j
& y3 {# ^ B$ f- n) g
十几年前，见过这些人，当时觉得都是牛人，可十几年过去了，这些人几乎都没长进，再看一下，基本都是土人了，呵呵。
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