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标题: 关于饲养层细胞的取材,欢迎大家积极讨论,发表高见。 [打印本页]

作者: zb_ming    时间: 2010-12-10 09:40     标题: 关于饲养层细胞的取材,欢迎大家积极讨论,发表高见。

做干细胞实验的同仁都知道,饲养层细胞几乎全部取材于小鼠,即mef。那么对小鼠的种系有要求吗?其它取材来源的饲养层细胞是否可行?比如大鼠、人等等。欢迎讨论。
作者: vae有何不可    时间: 2010-12-10 12:05

MEF是目前最主要的胚胎干细胞体外培养和建系的饲养层细胞,但有文章说存在一定的问题,比如说存在异源污染问题等。现在很多人在研究替代MEF的饲养层,比如说、人胰岛成纤维细胞系MNNK-1等。不过我感觉短期内应该没有能替代MEF的饲养层细胞出现。
作者: sunsong7    时间: 2010-12-10 15:13

是的,这个问题很有意思,第一个人用MEF做Feeder培养细胞成功后,其他人都跟随着走,是否有人在尝试绕道或超近道?
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我认为除了MEF,其他动物(兔、羊、猴)的成纤维细胞也有可能做细胞培养的饲养层,或者,不妨就拿人的MSC做饲养层。
作者: zsc78    时间: 2010-12-10 23:58

个人觉得肯定可以用人、大鼠等动物的成纤维细胞做饲养层细胞,只是现在公认的金标准是小鼠的成纤维细胞。查一查文献,已经有相关研究证实人来源的某些MSCs可以作为饲养层细胞。
作者: zb_ming    时间: 2010-12-12 11:26

看来其它细胞做饲养层不是不可以,只是极少有人去尝试,本人已经决定尝试用人源性细胞做饲养层细胞,哈哈,希望有相关经历的战友多多交流啊。
作者: lianshan87    时间: 2010-12-13 10:47

个人觉得虽然常用的是取材于小鼠较多,但人的也有用的,但是条件可能要再优化一下,而且一定要避免污染问题~
作者: starlancer    时间: 2010-12-13 10:58

饲养层的目的主要是为干细胞提供支持,分泌一些必须的因子等。对于其余来源的细胞用作feeder layer应该也没有什么问题,前提是这些细胞能够分泌足够的因子供给干细胞。但要注意的是,不同来源的饲养层细胞,其分泌产物是完全不同的,因此对干细胞的maintanance也会有影响。记得有篇文献很详细的分析了几种饲养层细胞的分泌物成分。现在用mef的效果已经很好了,如果要用新的细胞做饲养层,就需要全方位的生化,细胞学分析来进行证实该细胞是qualified的。至于种系的话可能会有差别,但差别不会很大吧。我记忆较深的例子就是gdnf因子对不同种系来源的spermatogonial stem cell的增殖促进效果有一定的差异吧。
作者: gact    时间: 2011-8-22 09:49

starlancer 发表于 2010-12-13 10:58 5 o; w4 ?& e' f% K. s
饲养层的目的主要是为干细胞提供支持,分泌一些必须的因子等。对于其余来源的细胞用作feeder layer应该也没 ...

/ }. e" Q% h. \) P文献支持??
作者: huangcong1988    时间: 2011-8-22 10:57

MEF,比较常见,常用,但是人,猪等的也有用来做饲养层的,其实可以用来比较一下,哪种作为饲养层更为高效
作者: dongxin    时间: 2011-8-23 09:36

作为饲养层的选取,报道使用较多的是鼠源的MEF,也有用人源的HFF!祝好运!
作者: dongxin    时间: 2011-8-23 09:36

作为饲养层的选取,报道使用较多的是鼠源的MEF,也有用人源的HFF!祝好运!




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