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标题: EB形成过程的问题~ [打印本页]

作者: wangzhuo822001    时间: 2010-12-18 22:30     标题: EB形成过程的问题~

最近做了几次EB都很失败~8 ^- e  \, A7 D; e
具体问题是:1.悬滴三天培养,发觉液滴里面的EB好像都不止一个,而且形态不一,最重要的是感觉有很多不规则形状的像死细胞团的杂质在液滴里面;4 V# e6 z9 S% `( n
2.把这些液体取下来悬浮,一天后培养基就变得比较浑浊了,感觉里面很多细胞碎片样的东西;8 t- P4 N! i% d& @5 W+ V
3.形成的所谓的EB感觉很松散,悬浮两天后感觉中间都没有密集的细胞,EB也不像EB了~( x1 l( S) K% ~
郁闷啊~~是不是细胞污染了?又不知道是什么污染~
) S# w2 A: M( u# X# Q' P3 }
. E9 H+ G% |; q; R9 k如果ES细胞就已经污染了,哭泣啊~那不是所有的实验都遭了~
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作者: st_oliver    时间: 2010-12-19 10:55

回复 wangzhuo822001 的帖子
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# }9 y9 l: O0 A; R: l/ F7 g( g8 q首先,楼主不要泄气,做实验经常会出现这样的情况,仔细分析找原因。: ]+ g6 D; {5 U* f/ N6 {* g9 f" [
其次,你的这种情况,我似乎也见过,EB形成的比较松散,不够致密有关,主要原因个人认为是细胞本身的缘故,如果操作什么都没问题的话,松散的话就会有细胞漂出去,单独再形成类EB。
# N  k) G. u+ o  j再次,至于你说的污染不污染,根据你的描述,也不一定可以确定,最好是能仔细检查下,要是污染了,就比较不幸了。要及时清查,消除污染源!) y) F; V8 m" R+ R: E6 @
最后,祝你实验顺利!
作者: nicoleQI    时间: 2010-12-19 20:21

EB的形成和你挑的细胞集落有重要关系的,挑比较致密的集落会长得好一点……




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