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标题: 基于pSUPER载体的shRNA通用构建程序 [打印本页]

作者: 芷瞻 时间: 2010-12-27 17:14 标题: 基于pSUPER载体的shRNA通用构建程序

本帖最后由细胞海洋于 2010-12-27 19:28 编辑
; J4 {$ a/ d- K: |: K& o
在基因功能研究过程中，不可避免地涉及到该基因的过表达（Over-Expression）与敲除（Knock-Out ）/敲低(Knock-Down)实验，常用的Knock-Down方法有siRNA与shRNA，各有利弊，在此，我提供一种本实验室屡试不爽的基于pSUPER载体的shRNA通用构建程序，供大家参考，不对之处敬请包涵指教。

基于pSUPER载体的shRNA通用构建程序.pdf (519.72 KB, 售价: 包包 10 )

附件: 基于pSUPER载体的shRNA通用构建程序.pdf (2010-12-27 17:13, 519.72 KB) / 下载次数 156
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=MTk1MzJ8ODM2NTk2ZGJ8MTc5MjgxODU2MHww

作者: cyperus 时间: 2010-12-28 10:11

怎么不能下载？

作者: 细胞海洋 时间: 2010-12-28 11:31

回复 cyperus 的帖子6 a9 [' F) l: m/ e$ r
3 B( n7 h$ Q/ U
你现在的级别是新手上路，需要到达注册会员级别才可以下载电子书专区的附件: ~: _- _, \6 _, Y' `: {7 l

新手上路升级注册会员级别需要威望达到504 B8 `/ Z8 M0 q! D& U! |" f

如何获得威望和包包？

http://www.stemcell8.cn/thread-16793-1-1.html

希望大家多多参与讨论赚取威望和包包。

作者: iseeyou1210 时间: 2011-1-7 18:26

这种精品,我只有顶的份!

作者: cicadacjk 时间: 2011-2-20 22:23

怎么感觉像一个实验室的

作者: 芷瞻 时间: 2011-2-21 09:04

回复 cicadacjk 的帖子

什么意思？

作者: aidiulgy9517 时间: 2011-2-22 10:38

回复芷瞻的帖子

谢谢芷瞻大侠

作者: 细胞海洋 时间: 2011-4-12 22:10

回复芷瞻的帖子 n& B3 x( S L% V. B
' w: n, \# k( ^
呵呵的确有很多人是很懒惰的这也是设置权限的原因

作者: 郇延军 时间: 2011-4-13 08:28

回复芷瞻的帖子: }9 [ [" m# `# \5 c3 e) z( v+ R

谢谢

作者: dqm185 时间: 2011-4-13 11:10

很好很好！！顶！！

作者: beiju 时间: 2011-4-16 14:43

谢谢啦~

作者: cjx321 时间: 2011-7-12 09:36

回复 cyperus 的帖子5 z# o/ \7 q: v5 U9 V
: l. M- y4 c0 o: m; p- @
怎么下不了啊

作者: 细胞海洋 时间: 2011-7-12 10:27

回复 cjx321 的帖子

你现在的级别是新手上路，需要到达注册会员级别才可以下载电子书专区的附件

新手上路升级注册会员级别需要威望达到50+ i. t2 Z& P/ h; {9 N5 M
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如何获得威望和包包？

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; [) H& ]3 f [% X' j) y% b2 l
希望大家多多参与讨论提升威望和包包。

作者: 芷瞻 时间: 2011-7-15 09:56

rain2402 发表于 2011-7-13 11:26 5 O! W& r2 @3 [/ S
我也想要一份。谢谢啦。麻烦你啦。我以后能下载了再给你包包。。

已经发送，注意查收，祝好！

作者: rain2402 时间: 2011-7-15 11:03

非常感谢。。。

作者: langziforever 时间: 2011-7-15 16:57

很好，帮你顶！

作者: sylar.wy 时间: 2011-8-13 10:17

嘿嘿，我是今年rotation的新生哦，师兄你在孵化器的吧？

6 P' A0 A* A9 S1 j$ N Y' E! r
没威望下载东西啊

作者: sylar.wy 时间: 2011-8-13 10:23

嘿嘿，我是今年rotation的新生哦，师兄你在孵化器的吧？

9 o" X! c+ D4 M/ o. s- C
没威望下载东西啊

作者: runsong 时间: 2011-8-14 22:11

做得真好

作者: runsong 时间: 2011-8-15 11:11

有两个问题请教。/ b) Z. p& M8 Z$ E# w
1、在U6启动子启动shRNA表达时，你是如何保证U6启动子的固定转录起始位点落在target sequence sence前的。你所加的通用引物骨架模板中的5-GATCCCC是不是起的这个作用。7 ?3 w* K+ T" h
2、合成的4条引物在变性退火后要不要用磷酸化酶处理一下，既然是普通的引物合成，那么5‘端是没有磷酸基的。还有你们要用4条引物，为何不用2条长引物呢，是怕突变吗。

作者: sylar.wy 时间: 2011-8-15 13:51

回复 runsong 的帖子5 ?( i6 s. r" U; p( ?; W

两条长引物的合成价格贵。。超过不知道多少个碱基后价格就贵了，分4条可以省钱。。

作者: runsong 时间: 2011-8-15 18:12

回复 sylar.wy 的帖子$ `: n* _6 ]! D7 V/ n. m3 j9 f
* p. u( D$ @0 n/ \3 Q
超过60

作者: istephen 时间: 2011-9-19 14:44

厄我还差一点 = =|||感谢楼主分享了

作者: cnsder 时间: 2012-5-20 17:09

怎么看不了

作者: shqinzhu 时间: 2012-5-21 20:40

太好了！！！

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