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标题: 小鼠骨髓MSC流式 [打印本页]

作者: feiyang 时间: 2011-1-2 14:31 标题: 小鼠骨髓MSC流式

请教大家，我的小鼠骨髓MSC貌似长的还不错，但是流式做下来，CD34、45都有95％左右阴性，但是CD105的阳性率只有65％。是不是就不能说这些细胞是MSC啊？非常郁闷。

作者: cell1314 时间: 2011-1-2 15:28

对于MSC的鉴定，因为不如HSC一样有比较特异性的标志，目前主要是通过组化及流式鉴定，FCM是通过组合标志，除了造血系的标志CD34、CD45阴性外，阳性的有CD29、CD73、CD90、CD166、SH-2、SH-3等等，CD105只是其中的一个，尽管只有65%左右，还要看其他CD分子的阳性比率才能综合判断你的MSC纯与不纯。

作者: cell1314 时间: 2011-1-2 15:31

不过感觉最重要的还是你的MSC诱导分化谱系分化能力，毕竟对于“干细胞”的定义来说，多向分化潜能是其核心内容之一。

作者: luluegret 时间: 2011-1-2 21:34

回复 cell1314 的帖子
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同意cell1314 的建议" |! n0 {) c% s4 v* u, H9 C- u
流式鉴定仅仅是一方面% `2 B: S; v, V" t1 }6 C# }% f+ U
更重要的是细胞向其他方向分化的能力

作者: yushi1105 时间: 2011-1-6 20:51

cell1314 的建议很好同时补充一下你的细胞来自骨髓又是小鼠的细胞可以考虑阳性的cd包括sca1 因为到目前为止还没有更好的cd marker证明哪一个marker阳性就一定是什么细胞所以没有必要盯着cd(surface marker)不放的祝顺利

作者: feiyang 时间: 2011-1-6 23:44

谢谢大家呢！感动！但是发文章时，需要有流式图啊，那样半阴半阳的不行吧？

作者: iceyang 时间: 2011-1-15 17:35

65%的阳性率已经很不错了，再做2批，看看表达的情况，取均值。

作者: nydfy 时间: 2011-1-18 15:34

小鼠骨髓MSC本来就不是一个纯的细胞系，有很多的亚群构成，而且目前也没有金标准定义MSC，所以这样的结果是正常的！

作者: 肉肉77 时间: 2013-2-27 18:53

麻烦问下楼主，最后你的细胞怎么样了？我做流式鉴定，用了CD11b，CD34，CD45（阴性）；CD44，CD73，CD90，CD105，Sca-I（阳性），但是有三个marker完全不正常：CD34只有很少部分阴性；CD90几乎全为阴性；CD105完全阴性（这个很奇怪，我用全骨髓细胞看的时候，CD105也显示全为阴性，所以我不确定是不是抗体有问题）。还有Sca-I，差不多4、50%的样子阳性，这样的话这群细胞还可以要吗？还有没有必要诱导分化？ ~: l( ^; B) Q9 ~
实在是养的很不容易，烦请指教，谢谢!

作者: 细胞海洋 时间: 2013-2-28 10:12

回复肉肉77 的帖子2 M4 Y6 B/ ?0 t9 H$ {

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作者: 肉肉77 时间: 2013-2-28 10:33

回复细胞海洋的帖子) `# c; D- B9 Y* y2 C2 J

我发了大家也在帮我解决问题但还没完全解决能麻烦前辈给我点建议吗？谢谢啦

作者: aijuqing 时间: 2016-4-25 12:59

我的小鼠MSC 流式鉴定也是，CD45和CD34比例很高，同求

作者: pauldong 时间: 2016-4-26 08:59

MSC的CD105标记有时是会不稳定，有可能是细胞的原因，也有可能是标记和检测方法的原因，建议多做几次，综合判断下，另外要结合其他指标，不能光看一个指标，还有三个方向的分化实验，一起综合判断。

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