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标题: 请问现在还有人用STO做饲养层吗？ [打印本页]

作者: carolshen 时间: 2011-1-11 14:54 标题: 请问现在还有人用STO做饲养层吗？

RT，如果有的话能谈谈你们是怎么处理的吗？

作者: niyou 时间: 2011-1-11 15:49

极少有人用STO，中科院的几个实验室几乎都不用这个做feeder，我也就用了几次，其实完全没有必要讨这个麻烦。处理的方法同MEF，10微克/毫升丝裂霉素C处理3小时。

作者: chochochocho 时间: 2011-1-11 17:10

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请问STO有什么缺点吗？

作者: hcluo 时间: 2011-1-11 17:15

STO作为饲养层，用于培养细胞，我觉得还行吧，我们实验室处理是用丝裂霉素C（sigma），终浓度是10ug/ml, 37度处理3个小时。然后铺到明胶处理的平板上面。基本是可行的。而且饲养方便。

作者: BIOLOGY 时间: 2011-1-11 20:31

我正在用STO的feeder，做的方法和普通MEF的一样，觉得用的还行，就是有点老得快

作者: carolshen 时间: 2011-1-11 21:06

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! C+ C+ K8 D5 _# \
丝裂霉素C我们买不到sigma 适合细胞培养级别的了，只能用罗氏分装的，不知道你是买的哪一种？

作者: carolshen 时间: 2011-1-11 21:07

回复 hcluo 的帖子1 t6 Y+ Z% ?: Q6 ^

还有请问：你们在培养STO时是否有圆形的小突起，而且数量还不少？不清楚这样的是否属于正常，纠结呢

作者: carolshen 时间: 2011-1-11 21:07

回复 BIOLOGY 的帖子# a( A$ ]5 { Z- D

有圆形的细胞吗？

作者: hcluo 时间: 2011-1-11 21:36

我们实验室用的是sigma分装的，是中国一家公司代理的。圆形细胞，可能是不是细胞还处于分裂增生状态，一般3天就可以长好，形成梭形形状的，不知道你们要培养多长时间？

作者: carolshen 时间: 2011-1-12 09:18

回复 hcluo 的帖子* w. k/ u7 N+ _+ H

1:3 一般2到3天。不应该是出于分裂期的，因为这些细胞一直有，如果是分裂期的，在相差下为发亮的吧，我的这个就是在一些梭形中有圆形的细胞，不知道你们有没有这样的情况？

作者: hcluo 时间: 2011-1-12 14:20

对了，你有图吗？最好上传一点实物。

作者: carolshen 时间: 2011-1-12 17:15

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1 D) S: r# ^' O
[attach]20319[/attach]
红色箭头是在培养中遇到的问题，麻烦鉴定，谢谢啦！

作者: hcluo 时间: 2011-1-12 18:50

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你的STO好像不是梭形的吧，可能是你的倍数太低了。另外，哪些一团团的黑的，感觉像是太密了形成的。

作者: carolshen 时间: 2011-1-12 20:49

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我的那个是放大40倍的，如果是200倍放大的话，看不明显，能否传两张你的STO的形态照片，放大40和200的？如果可以，处理后的也传张看看，多谢多谢哈！' r7 ?- R/ J; P, ?! W# Y
也可以发我邮箱shf222@gmail.com

作者: BIOLOGY 时间: 2011-1-13 09:02

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有，圆圆的并且很亮，有时和克隆很难分清楚

作者: carolshen 时间: 2011-1-13 14:24

回复 BIOLOGY 的帖子+ z+ E# f, r/ q2 T6 p

是四百倍镜下看的吧，不知他们用MEF的会不会有这样的现象0 J) K- e* ~* F a5 e6 h
我的就是正常培养未处理时会出现圆形的就像我在上面发的图中红色箭头指的那样

作者: BIOLOGY 时间: 2011-1-13 16:56

回复 carolshen 的帖子0 X3 P" v9 O ^5 Q, D

MEF我还没发现这种情况，我是刚开始用STO的饲养层，我一直都觉得STO看着怪怪的

作者: jhu132llh 时间: 2011-1-14 11:43

我们用的就是STO。用丝裂霉素C 10ug/ml 37度3小时。% d. W1 t# E9 T: `
STO做feedergeren 觉得还挺好的。生长速度快，增殖快。3 k8 N6 g- |7 @$ Y& H% E: j$ x
处理后一般能挺住5-7天不用补种。' m4 H; d0 J o' T
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至于生长过程中的圆形细胞，是属于培养所有细胞过程中都会出现的现象，贴壁细胞呈圆形悬浮状，折光度很强，不要紧的，那个是个别的生长状态不好将凋亡的细胞

作者: w1986725 时间: 2011-1-14 12:40

用STO养过rES ，克隆长得不错，不知你是想问什么处理方法？

作者: 是鸟就要去飞 时间: 2011-2-16 14:37

觉得sto还是很好用的，我们用的就是，养细胞还可以，也是mmc处理的

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