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标题: 技术方法询问 [打印本页]

作者: phdyhm 时间: 2011-1-11 19:14 标题: 技术方法询问

要研究骨髓间充质干细胞在组织修复过程中的生长因子网络的调控，用什么方法比较好？我想利用基因芯片，但不知道这种方法的有效性和可行性。求教于各位高手！！！！

作者: luoziwei 时间: 2011-1-11 19:56

基因芯片当然好，就是有点贵。可以用病毒转染超表达的方法呀

作者: cigoo 时间: 2011-1-11 19:58

首先我不是高手，但对你的问题很感兴趣，所以讨论一下。
研究生长因子网络调控的文章很多，可以找个数据库下载，技术方法也很多。- w0 T0 f' J( Z3 ]9 R; W% L& F$ m
基因芯片代价太高，我们实验室也在做一些信号通路的研究，主要采用的技术路线可以概括为：抑制剂+RNAi。方法比较常规：western blotting, rt-PCR.
当然检测各个通路中蛋白一系列抗体必须具备。
其次，是不是可以用2D检测一些蛋白的差异表达，当然银染就不够了。还是要用好抗体，最好是荧光二抗，分辨率好。

作者: cigoo 时间: 2011-1-11 20:02

补充一点：上面提到的抑制剂+RNAi。$ _: w5 t7 { `
有特异的抑制剂最好，没有的话就只好用RNAi了。当然后者自有其局限，比如，脱靶现象。这里不作讨论。5 |2 J+ m" B( N# Y7 p9 W8 D( C
盼望进一步讨论，its very interesting

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