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标题: 请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志 [打印本页]

作者: 牙牙丫丫123 时间: 2011-1-13 14:27 标题: 请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

本帖最后由细胞海洋于 2011-1-13 18:49 编辑 + T; Z9 Q i4 V1 T4 `9 s
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请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

作者: zerollx 时间: 2011-1-14 08:39

回复牙牙丫丫123 的帖子) Q, j! [2 q4 Y. g. e* l
; k" w: l- @4 y/ O* y6 Z; g
三胚层的鉴别+ y) I2 k3 ]& A; G' k7 o
  1、形态学观察：ESC在不同的发育阶段有不同的形态，在11天时则出现典型的三胚层形态，可用相差显微镜观察。
2、三胚层中表达的特征蛋白的检测：免疫组化实验检测，EBs分化15d左右, 中胚层心肌细胞特异性标
志蛋白c TnT( 图9) , 外胚层特异性标志蛋白Nestin+ H" q% w# {4 b2 b
3、三胚层中标记基因的检测：在ESC发育各阶段提取总RNA,个标记基因的引物进行RT-PCR，电泳鉴定片段大小来检测是否有表达。  Q# y; b5 ^- p3 Q7 A' k+ e
   内胚层：特征性基因转甲状素蛋白、甲胎蛋白在EBs 分化的初期不表达,从分化的第7d 起开始表达6 E9 N4 S* U/ W: Z1 o  x, g
中胚层：波形蛋白等7 c( k$ N7 [# V& k" u) c, v9 x
外胚层：巢蛋白等
具体你可以看这篇文章：体外分化过程中小鼠拟胚体的细胞学特征及基因表达模式

作者: 牙牙丫丫123 时间: 2011-1-15 15:16

呵呵，不错……

作者: iyaofying888 时间: 2011-1-25 22:51

非常好呀

作者: coralqin 时间: 2011-2-8 10:59

刚想回复呢，仔细一看zerollx 贴出了本人以前发的一篇文章，惭愧:$

作者: 细胞海洋 时间: 2011-2-8 21:05

回复 coralqin 的帖子; q+ N2 ?4 Q3 {+ L0 V# H. W1 E
- y+ ~" S! |" e5 c
欢迎原创作者发表意见

作者: jjjk127 时间: 2011-6-27 17:14

好东西，学习:)

作者: lp871 时间: 2012-4-1 00:05

:D:D:D

作者: shuishan 时间: 2012-6-13 15:49

请教各位大牛：想做IPS向心肌细胞的诱导分化，请问形成EB后贴壁生长多久可见到心肌细胞，是不是可以见到心肌细胞跳动？上面说15天左右可检测到心肌细胞特异性标志蛋白c TnT，若想用分化的心肌细胞做下一步实验，是不是只要检测到了这种标志就可以了？怎样将其纯化了？好像心肌细胞是不可再生的，那这样分化得来的心肌细胞能否进行传代增殖呢？

作者: 细胞海洋 时间: 2012-6-14 01:27

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作者: sunny1987324 时间: 2012-8-8 13:39

看来有很多人在做EB啊。

作者: sunny1987324 时间: 2012-8-8 13:40

看来有很多人在做EB啊。

作者: 守茱逮兔 时间: 2013-2-25 10:40

怎么下载了打不开啊？:o

作者: 细胞海洋 时间: 2013-2-26 10:20

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